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CRISPER-CAS系統(tǒng)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建(安諾倫)

步驟服務(wù)內(nèi)容服務(wù)描述1實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)根據(jù)客戶所需敲除基因的需求，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，可以根據(jù)客戶需求定制服務(wù)2GFP-CRISPR/Cas9 質(zhì)粒設(shè)計(jì)合成根據(jù)客戶提供的待沉默基因序列，設(shè)計(jì)GFP-CRISPR/Cas9 質(zhì)粒并合成質(zhì)粒3病毒同源重組將

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型號(hào)：CRISPER-CAS系統(tǒng)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建
品牌：安諾倫
產(chǎn)地：北京

安諾倫（北京）生物科技有限公司

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步驟	服務(wù)內(nèi)容	服務(wù)描述
1	實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)	根據(jù)客戶所需敲除基因的需求，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，可以根據(jù)客戶需求定制服務(wù)
2	GFP-CRISPR/Cas9 質(zhì)粒設(shè)計(jì)合成	根據(jù)客戶提供的待沉默基因序列，設(shè)計(jì)GFP-CRISPR/Cas9 質(zhì)粒并合成質(zhì)粒
3	病毒同源重組	將攜帶目的基因片段的穿梭質(zhì)粒線性化后與腺病毒大骨架質(zhì)粒共轉(zhuǎn)入在特定的大腸桿菌中進(jìn)行同源重組，由于腺病毒骨架質(zhì)粒是氨芐抗性，而與穿梭質(zhì)粒同源重組后，氨芐抗性丟失，同時(shí)表達(dá)卡那霉素抗性，因此，通過抗性的變化可篩選出腺病毒載體骨架重組子，挑取重組子進(jìn)行酶切鑒定，挑選酶切鑒定正確的克隆，進(jìn)行下一步腺病毒載體的包裝。
4	病毒包裝	將篩選到的重組腺病毒運(yùn)用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，由于腺病毒載體基因組中的早期基因E1缺失，利用帶有E1基因的細(xì)胞作為包裝細(xì)胞，一至兩周即可包裝出E1缺失的腺病毒載體，通過倍比擴(kuò)增，富集病毒顆粒。對(duì)絕大多數(shù)的細(xì)胞株可以達(dá)到近乎100%的感染效率。
5	結(jié)果交付	交付具有高感染效率的病毒；被病毒感染的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系；（還可提供GFP-CRISPR/Cas9 質(zhì)粒）
	實(shí)驗(yàn)報(bào)告	包含上述每個(gè)步驟的詳細(xì)報(bào)告，所用試劑，實(shí)驗(yàn)耗材等信息；包含病毒感染報(bào)告。

CRISPER-CAS系統(tǒng)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建價(jià)格

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