99啪99精品视频在线观看,久久久久免费一区二区三区,久久中文字幕爱爱视频,欧美日韩国产免费一区二区三区

關(guān)注公眾號(hào)

關(guān)注公眾號(hào)

手機(jī)掃碼查看

手機(jī)查看

大分子藥物生物分析中的主要應(yīng)用技術(shù)

丹納赫生命科學(xué)
2023.6.08

生物大分子藥物目前主要包括治療性蛋白藥物與核酸藥物等,隨著生物技術(shù)的迅速發(fā)展,生物大分子已被普遍用以治療腫瘤、本身免疫系統(tǒng)疾病和遺傳代謝病等多種疾病。生物治療藥物在臨床和商業(yè)上的成功引起了行業(yè)內(nèi)對(duì)其開發(fā)的日益重視,需要高質(zhì)量的生物分析來支持這些藥物的開發(fā)。

與常規(guī)藥物一樣,評(píng)估大分子藥物的安全性和有效性需要徹底了解其藥代動(dòng)力學(xué)(PK)、藥效學(xué)(PD)、毒代動(dòng)力學(xué)(TK)以及免疫原性等特征。在藥物與機(jī)體相互作用中,PK是研究機(jī)體對(duì)藥物的處置作用,而PD和TK是分別研究藥物對(duì)機(jī)體有益/有害的效應(yīng)。PD/PK和PK/TK的相互關(guān)系是藥物藥理學(xué)評(píng)價(jià)的核心。FDA、NMPA等監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求藥物進(jìn)入臨床前必須證明其有效性和安全性,臨床前和臨床研究均需要研究藥物的PK,同時(shí)FDA建議對(duì)免疫原性風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)最好在IND階段和臨床I期開展。因此,建立好的PD/PK/TK等生物分析方案對(duì)于大分子藥物的臨床前及臨床分析評(píng)價(jià)極為重要。

與小分子藥物相比,大分子藥物具有分子量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、細(xì)胞外基質(zhì)不容易透過、使用量低、身體易溶解等特性,其生物分析充滿挑戰(zhàn)。

生物大分子藥物與傳統(tǒng)小分子藥物的藥代動(dòng)力學(xué)

特征比較(藥學(xué)進(jìn)展?,2018年8期?)

傳統(tǒng)的生物分析方法通常依賴于基于小分子檢測(cè)的液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)和基于生物制劑的配體結(jié)合分析(ligand-binding assay,LBA)),目前這兩種方法也用于抗體等生物藥的生物分析中。在現(xiàn)在的創(chuàng)新藥物中,還有mRNA、病毒載體、細(xì)胞治療產(chǎn)品等,這些藥物本質(zhì)上并非蛋白質(zhì)藥物,因此qPCR、流式細(xì)胞術(shù)、成像技術(shù)等手段也越來越多地用于生物藥的生物分析中。

01

基于配體結(jié)合分析

生物分析中基于配體結(jié)合分析LBA是一種常用的分析工具,用于根據(jù)與其他生物分子的相互結(jié)合作用(binding interaction),定量測(cè)定生物分子(目標(biāo)分析物,Analyte)在生物體液中的濃度,主要包括酶聯(lián)免疫(ELISA)等。

目前ELISA是生物制藥行業(yè)使用最廣泛的配體結(jié)合式(LBA)檢測(cè)平臺(tái),它一直以來都是蛋白質(zhì)定量分析最常用的技術(shù),現(xiàn)在大多數(shù)生物標(biāo)志物的商業(yè)檢測(cè)試劑盒都是基于ELISA的。這項(xiàng)技術(shù)對(duì)于某些臨床前生物分析的應(yīng)用仍然很有吸引力,比如血清單克隆抗體的PK。但是ELISA操作復(fù)雜、測(cè)試運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng),采用自動(dòng)化平臺(tái)可縮短分析人員操作的時(shí)間, 提高工作效率。

丹納赫生命科學(xué)旗下貝克曼庫(kù)爾特的Biomek i7自動(dòng)化工作站結(jié)合美谷分子儀器的SpectraMax i3 多功能酶標(biāo)儀,可以自動(dòng)化地對(duì)樣本進(jìn)行高通量的ELISA操作,大大避免實(shí)驗(yàn)誤差及重復(fù)的人工勞動(dòng)。

自動(dòng)化工作站進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)流程

自動(dòng)化工作站進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果

02

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)系統(tǒng)LC-MS/MS

與LBA 相比,LC-MS/MS 在生物分析中的優(yōu)勢(shì)在于可以提供快速的方法開發(fā)和驗(yàn)證、高特異性和高重現(xiàn)性,還可以實(shí)現(xiàn)多種分析物同時(shí)定量。另外,LC-MS/MS 方法也更容易在不同的分析物類別和基質(zhì)之間轉(zhuǎn)移。但是靈敏度、樣品制備、方法開發(fā)和定量準(zhǔn)確度相關(guān)的難題也亟需解決。

丹納赫生命科學(xué)旗下SCIEX開發(fā)了一種通用的混合LBA和LC-MS/MS兩種技術(shù)的工作流程,該工作流程結(jié)合了這兩種技術(shù)的優(yōu)勢(shì),可用于蛋白質(zhì)藥物的PK分析。該方法檢測(cè)阿達(dá)木單抗在小鼠血漿中的濃度,先用磁珠方法進(jìn)行免疫親和性樣品的制備,然后將阿巴利單抗標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行消化后進(jìn)入TripleTOF? MS系統(tǒng)進(jìn)行肽圖譜分析,用以選擇蛋白質(zhì)定量的特征性肽段。在QTRAP 6500+系統(tǒng)進(jìn)行定量分析后,50 到 10000 ng/mL 的線性關(guān)系可達(dá)0.99763,定量限為50 ng/mL。

LC-MS/MS方法的前處理流程

阿達(dá)木單抗的提取離子色譜圖? ?

SCIEX QTRAP? 6500+ 系統(tǒng)

03

qPCR技術(shù)

qPCR法是常用的分析核酸藥物表達(dá)量的一種方法,其定量下限可以達(dá)到pg/mL甚至fg/mL,這可以極大增強(qiáng)藥物在體內(nèi)暴露的檢測(cè)時(shí)間。此外,RT-qPCR使用的樣本量極少,只需要幾微升血漿樣本或1毫克組織即可滿足分析需求,減少了對(duì)珍貴樣本的使用,而且能夠使用384孔板實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的高通量分析。然而獲得信號(hào)特異、低背景的qPCR結(jié)果也非易事,丹納赫生命科學(xué)旗下IDT埃德特的雙淬滅熒光探針,在靠近報(bào)告基團(tuán)9bp左右的位置增加一個(gè)中間淬滅基團(tuán),為FRET作用中提供了一個(gè)能量的“中轉(zhuǎn)站”,拉近了能量傳遞中每個(gè)基團(tuán)間的距離,從而提高了熒光淬滅率降低了背景信號(hào)。

IDT 雙淬滅熒光探針示意圖

(藍(lán)色序列片段即為雙淬滅熒光探針)

在過去20年中,新型治療方式的出現(xiàn)改變了生物分析領(lǐng)域的現(xiàn)狀,導(dǎo)致了一系列技術(shù)的發(fā)展和成熟。在發(fā)現(xiàn)階段以及藥物開發(fā)的臨床前和臨床階段,健全的生物分析方法非常重要,這將有助于開發(fā)更安全、更有效的藥物,同時(shí)減少開發(fā)的時(shí)間和成本。丹納赫生命科學(xué)一系列先進(jìn)的生物分析工具和方法能夠有效幫助應(yīng)對(duì)創(chuàng)新藥物復(fù)雜結(jié)構(gòu)和不同作用機(jī)制對(duì)PK、PD和免疫原性評(píng)估提出的重大挑戰(zhàn)。

更多產(chǎn)品信息咨詢,

文章作者
推薦
關(guān)閉
亚洲一区二区欧美激情| 成人午夜视频精品一区| 亚洲精品成人午夜久久| 最新日韩精品一推荐日韩精品| 可以在线看的欧美黄片| 久久大香蕉一区二区三区| 国产又粗又猛又长又黄视频| 亚洲中文字幕视频一区二区| 精品午夜福利无人区乱码| 亚洲夫妻性生活免费视频| 欧美午夜一级特黄大片| 黄片美女在线免费观看| 在线视频三区日本精品| 久久精品中文扫妇内射| 日本高清一区免费不卡| 亚洲一级二级三级精品| 丰满人妻一二区二区三区av| 国产又粗又猛又长又大| 99久久精品国产日本| 国产一区欧美一区二区| 99热九九热这里只有精品| 色欧美一区二区三区在线| 中文字幕精品一区二区年下载| 亚洲一区二区三区熟女少妇| 中国一区二区三区不卡| 五月婷婷六月丁香狠狠| 小黄片大全欧美一区二区| 久久精品国产亚洲熟女| 欧美黄色黑人一区二区| 日韩人妻毛片中文字幕| 肥白女人日韩中文视频| 精品日韩中文字幕视频在线| 久久99爱爱视频视频| 国产乱人伦精品一区二区三区四区| 日韩亚洲精品国产第二页| 亚洲中文字幕在线观看四区| 免费精品国产日韩热久久| 欧美精品二区中文乱码字幕高清| 亚洲男人天堂网在线视频| 激情偷拍一区二区三区视频| 色婷婷成人精品综合一区|