色譜小知識:高效液相色譜系統(tǒng)常用的檢測器
高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)檢測器作為高效液相色譜儀的重要組成部分之一,它的作用是將流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,從而實現(xiàn)定性定量。
HPLC檢測器有多種類型,如何正確選擇檢測器很重要。由于樣品組分在流通HPLC系統(tǒng)時會發(fā)生變化,因此選擇哪種檢測器主要取決于樣品及其組成成分的性質,或者流動相和樣品在通過HPLC系統(tǒng)時其組成發(fā)生變化的整體性質。下面咱們就從幾方面來簡單介紹下常用的幾種高效液相色譜檢測器。
?HPLC檢測器功能
不同的HPLC檢測器需具備的一些共同特征,包括:
對混合物中化合物的反應是否具有專一性
針對分析物而非流動相的靈敏度和響應度
低流通池體積以最大限度地減少分析物譜帶擴散
對分析物濃度的線性響應
溫度和流速的變化不應影響檢測器響應
常用HPLC檢測器
質譜檢測器(MS)
分析物首先在離子源中電離,并根據(jù)它們的質荷比進行分離。質譜檢測器可以提供高靈敏度及選擇性。
紫外吸收檢測器(UV)
紫外吸收檢測器的類型有固定波長、可變波長和二極管陣列檢測三種類型,適用于有較強的紫外光吸收能力的物質檢測。
光電二極管陣列檢測器(PDA)
可以同時測量多個波長吸光度的可變波長型UV/Vis檢測器。其主要優(yōu)勢是可以檢測每種分析物吸光度最大的波長(λ max),從而最大限度提高每種分析物的靈敏度。
熒光檢測器(FLD)
熒光檢測器是靈敏度和特異性很高的檢測器,它包括單波長、多波長和激光感應檢測器。FLD檢測器適用于本身自帶熒光基團或衍生化后能產生熒光的化合物。
其他特殊HPLC檢測器
電導檢測器(ELCD)
ELCD的工作原理是使用由流通池組成的傳感器測量流動相電導率,流通池包含由鉑、鋼或貴金屬制成的兩個電極。
示差折光檢測器(RID)
RID依賴于由于洗脫物的存在而產生的流動相折射率的變化,它的靈敏度最低,但仍被認為是通用型檢測器。
電化學檢測器(ECD)
ECD包括平衡和動態(tài)檢測器,它們對流動相的組成或流速的變化敏感,用于檢測一些具有氧化還原性質的化合物。
蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)
ELSD有兩種類型,包括低角度光散射和多角度光散射檢測器。它可以測量散射光,是在洗脫液通過傳感器單元時基于分子大小檢測高分子量分子的理想方法。
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