北京萊伯泰科儀器股份有限公司

耗材專區(qū)血液中咖啡因的測定

2022.11.11

1、前言

咖啡因是一種黃嘌呤生物堿化合物，是一種中樞神經(jīng)興奮劑，能夠暫時的驅(qū)走睡意并恢復(fù)精力，臨床上用于治療神經(jīng)衰弱和昏迷復(fù)蘇。有咖啡因成分的咖啡、茶、軟飲料及能量飲料十分暢銷，因此，咖啡因也是世界上最普遍被使用的精神藥品。適度地使用咖啡因具有舒張血管、促進血液循環(huán)、預(yù)防高血壓、心肌梗塞、利尿、解毒、抗氧化、抗衰老、減肥等藥理和生理作用，但是，大劑量或長期使用也會對人體造成損害，能夠?qū)е?/span>“咖啡因中毒”，如神經(jīng)過敏，易怒，焦慮，震顫，肌肉抽搐（反射亢進），失眠和心悸。中國把咖啡因列為“精神藥品”管制，屬于一種毒品。目前有關(guān)咖啡因檢測分析的研究報道不多，為此本文通過使用SPE 1000全自動固相萃取系統(tǒng)對人體血液中咖啡因進行回收率測定分析，探索血液咖啡因樣本檢測的方法。

2、實驗過程2.1儀器與試劑

SPE 1000全自動固相萃取系統(tǒng)，萊伯泰科

MV5多通道平行濃縮系統(tǒng)，萊伯泰科

LC600 二元高壓梯度高效液相色譜，萊伯泰科

EZsep^TMHLB固相萃取柱，（60mg/3mL北京萊伯帕茲檢測科技有限公司?貨號：PZ12602）

血液替代品：牛血清，市售

2.2工作液配制

咖啡因標(biāo)準(zhǔn)儲備液：100μg/mL

咖啡因標(biāo)準(zhǔn)工作液：取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液放入10mL容量瓶中，用甲醇定容配置成10μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液?

2.3實驗部分

2.3.1樣品制備

取血液樣本1mL加入磷酸鹽緩沖液1mL平衡，加入50μL標(biāo)準(zhǔn)工作液，混合均勻，加標(biāo)濃度為500ng/mL，待固相萃取。

2.3.2凈化與濃縮

EZsep^TMHLB固相萃取柱，（60mg/3mL北京萊伯帕茲檢測科技有限公司?貨號：PZ12702）用5mL甲醇乙酸乙酯（1：1）、5mL水和5mL磷酸鹽緩沖液進行活化，取全部樣液上樣，上樣結(jié)束后用2mL磷酸鹽緩沖液和2mL水淋洗萃取柱，在真空狀態(tài)下干燥0.5min，最后用5mL 磷酸鹽緩沖液近干后，用流動相定容至1mL 。渦旋混勻，0.22μm濾膜過濾，待檢測。

2.3.3?高效液相色譜檢測條件

色譜柱：Promosil C18，5μm，4.6*150mm

波長：272nm

流速：1mL/min

柱溫：40℃

進樣量：20μL

流動相：甲醇-水= 24：76

3、實驗結(jié)果

圖1標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖

圖2加標(biāo)樣品色譜圖

圖3空白樣品色譜圖表1 加標(biāo)回收率結(jié)果

4、結(jié)論

本次實驗展示了一種使用EZsep^TMHLB固相萃取柱，（60mg/3mL北京萊伯帕茲檢測科技有限公司?貨號：PZ12702）對血液中咖啡因進行萃取凈化，其加標(biāo)回收率95.8%~99.2%，重復(fù)性RSD為1.6%。說明EZsep^TMHLB固相萃取柱適用于血液中咖啡因的檢測，并且在回收率和平行性上表現(xiàn)優(yōu)異。

關(guān)于萊伯泰科北京萊伯泰科儀器股份有限公司（股票代碼：688056.SH）成立于2002年，是一家專業(yè)從事實驗分析儀器的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的科技型公司。公司自成立之初便專注于科學(xué)儀器設(shè)備的研發(fā)，立志為環(huán)境檢測、食品安全、醫(yī)療衛(wèi)生、疾病控制、材料研究等眾多基礎(chǔ)科學(xué)及行業(yè)應(yīng)用提供實用可靠的實驗室設(shè)備和檢測實驗室建設(shè)整體解決方案。公司發(fā)展至今已擁有各類專利及軟件著作權(quán)100余項，持續(xù)通過高新技術(shù)企業(yè)認(rèn)證，連續(xù)多年被業(yè)內(nèi)媒體評為中國儀器儀表行業(yè)“最具影響力企業(yè)”，是全球范圍內(nèi)能將多種類和多功能的樣品前處理技術(shù)與全自動實驗分析檢測平臺組合成全自動實驗分析儀器系統(tǒng)的主要實驗分析儀器供應(yīng)商之一。公司擁有LabTech、CDS、Empore等行業(yè)知名品牌，在中國和美國設(shè)有研發(fā)和生產(chǎn)基地，并在中國內(nèi)地主要城市、中國香港、美國馬薩諸塞州和賓夕法尼亞州等地設(shè)有產(chǎn)品營銷和服務(wù)中心。公司產(chǎn)品服務(wù)涵蓋實驗室分析儀器、樣品前處理儀器、實驗室設(shè)備、醫(yī)療設(shè)備、實驗室耗材和實驗室工程建設(shè)等，可為全球多種類型用戶提供從實驗室建設(shè)到樣品分析的一站式解決方案。目前，公司產(chǎn)品已銷往全球90多個國家，累計服務(wù)客戶3萬余家。

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