PCR產(chǎn)物的檢測方法有哪些
1.瓊脂糖凝膠電泳
同時(shí)點(diǎn)分子量marker,根據(jù)marker條帶判斷產(chǎn)物分子量大小,從而大致判斷是不是你要的
2.酶切
已知你產(chǎn)物的序列,看上面有什么酶切位點(diǎn),用一個(gè)酶或者兩個(gè)酶切斷,看與理論預(yù)測的條帶數(shù)目和大小是否一致。一般檢測有以上兩步就行了,如果需要知道確切的需要進(jìn)行3
3.測序
連接到pMD-18t
載體上,轉(zhuǎn)到大腸桿菌中。拿到公司去測序,測序結(jié)果通過gene
bank比對看與哪個(gè)基因一致,這種方法最準(zhǔn)確
4.表達(dá)
pcr產(chǎn)物連到真核或者原核表達(dá)載體上,適宜條件表達(dá)出來以后的蛋白做質(zhì)譜分析,看與理論產(chǎn)物表達(dá)的蛋白是否有一致的片段
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