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咪唑、尿素怎么配

2022.12.22

尿素在純化包涵體時(shí)用,一般用8M的尿素加到含有咪唑的磷酸緩沖液中,純化可溶性蛋白時(shí)不用加尿素。
洗雜蛋白時(shí)咪唑的濃度一般是20mM。洗脫目的蛋白時(shí)咪唑濃度在500mM時(shí)能將大部分蛋白都洗脫下來(lái),如果想讓蛋白純度高的話,可以用不同的咪唑濃度,設(shè)置成梯度進(jìn)行洗脫,我們實(shí)驗(yàn)室一般是80mM,100mM,200mM,500mM,但是用梯度洗脫有個(gè)缺點(diǎn)就是可能你的目的蛋白被稀釋?zhuān)瑵舛冉档汀?/p>

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