生化常規(guī)項目在一次性定標(biāo)后允許誤差時限的探討
? 目的? 探討臨床生化常規(guī)項目在全自動生化分析儀檢測儀校準(zhǔn)、室內(nèi)質(zhì)控的有效方法，了解不同項目在不同時限需要重新定標(biāo)校正，作為本實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)合理化的工作模式，確保全自動生化分析儀常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法? 將本室所做的常規(guī)生化檢測項目每次定標(biāo)后，以2h檢測一次計算定值血清結(jié)果，建立質(zhì)控系統(tǒng)進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，進(jìn)行對比，并對結(jié)果作統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果? 在12h內(nèi)TP ALB TB DB ALT AST ALP GGT CHO TG CK CK-MB LDH HDH BUN Cl－PUA結(jié)果分析，差異無顯著性(P＞0.05)；K＋ Na＋ Ca２＋ CO2 Cr AMY結(jié)果分析，差異有顯著性(P＜0.01)。結(jié)論? 科學(xué)地分析和定時進(jìn)行定標(biāo)監(jiān)控，建立起合理化的室內(nèi)質(zhì)控系統(tǒng)，是保證全自動生化分析儀檢測所有項目結(jié)果可靠性的最有效措施。
??? 在全自動生化分析儀檢測過程中，質(zhì)量控制定標(biāo)校正是每天必須要做的工作之一，通過室內(nèi)質(zhì)量控制的目的來判斷本批次的測定是否在允許誤差范圍之內(nèi)，由于每天檢測工作量或隨時隨做的急診項目種種原因，定標(biāo)到項目的檢測過程有一段時間，定標(biāo)至檢測這一時間長短不一。那么，定標(biāo)后多長的時間才出現(xiàn)對測定項目結(jié)果產(chǎn)生誤差影響而需要從新定標(biāo)檢測。為了解定標(biāo)至檢測時限對檢測結(jié)果誤差增大的影響原因，筆者進(jìn)行了這方面的研究探討，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。
1? 材料與方法
1.1? 儀器與試劑?
日本生產(chǎn)的奧林巴斯AU400型全自動生化分析儀；質(zhì)控品為美國貝克曼庫爾特有限公司(Trid.link)生產(chǎn)的復(fù)合非定值臨床化學(xué)控制血清，批號：EX1-0312R，EX2-0312R。
1.2? 方法?
用定值血清定標(biāo)后，每2h檢測一次質(zhì)控血清樣本，各測2次，取平均值，當(dāng)變動偏離靶值1.5mmol/L或5%時結(jié)束，連續(xù)測量12h，其余的項目分別進(jìn)行24h、48h和72h的檢測，觀察定標(biāo)后在一定時限所檢測質(zhì)控血清檢測值的變化情況。
1.3? 所檢測的項目有?
鉀(K＋)ISE法、鈉(Na＋)ISE法、氯(Cl－)ISE法、鈣(Ca２＋)OCPC法、磷(P)磷鉬酸紫外法、葡萄糖(GCU)氧化酶法、肌酐(Cr)苦味酸法、尿素氮(BUN)脲酶速率法、總蛋白(TP)雙縮脲法、白蛋白(ALB)溴甲酚綠法、尿酸(UA)尿酸過氧化酶法、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)IFCC速率法、總膽紅素(TB)重氮鹽法、甘油三酯(TG)CPO-PAP法、膽固醇(CHO)膽固醇氧化酶法、淀粉酶(AMY)酶法、肌酸激酶(CK)DCKC速率法、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)IFCC速率法、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)DCKC速率法、乳酸脫氫酶(CDH)DCKC速率法、高密度脂蛋白(HDL)DCKC速率法、堿性磷酸酶(ALP)對基苯胺速率法、低密度脂蛋白(LDL)L-P速率法，共23個非定值質(zhì)控血清參考值項目。
1.4? 統(tǒng)計學(xué)處理?
所有檢測參數(shù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理，P＜0.05為差異有顯著性，P＜0.01為差異有極顯著性。
2? 結(jié)果
??? 23個項目12h在全自動生化分析儀檢測結(jié)果見表1。表1? 23個項目12h測定結(jié)果(D=2h)(略)
一次性定標(biāo)后在不同時限不同的檢測項目質(zhì)控血清測定值進(jìn)行理論值相對偏差比較分析有顯著性變化，在12h后變動偏離靶值1.5mmol/L或5%的項目K＋ Na＋ GCU Cr UA ALP AMY，差異有極顯著性(P＜0.01)，詳見表1。在24h質(zhì)控血清測定值變動偏離靶值1.5mmol/L或5%的項目分別有Cl- Ca２＋ BUN，48h的有P、HDL，差異有極顯著性(P＜0.01)，見表2。其中TB ABL TG CHO ALT TB AST CK GGT CDH LDL在72h內(nèi)質(zhì)控血清測定值變動偏離靶值＜1.5mmol/L或5%差異無顯著性(P＞0.05)。表2? 12h后的檢測項目結(jié)果（略）
3? 討論
不管哪個實(shí)驗(yàn)室要獲得可靠的測定結(jié)果，都需要建立一個全面的質(zhì)量控制管理體系［1］。在全面質(zhì)量管理體系中，實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制是一個最重要的環(huán)節(jié)。目前衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心在美國CLLA’88規(guī)定的基礎(chǔ)上制定了我國臨床實(shí)驗(yàn)室主要檢測項目的Tea，并建議我國實(shí)驗(yàn)室可據(jù)此制定自己實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和措施［2］。根據(jù)這一要求，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室的工作環(huán)境等實(shí)際情況，在確定23項臨床化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)條件下的變異系數(shù)(RCV)R的室內(nèi)質(zhì)控有效方法同時，還進(jìn)行了不同項目定標(biāo)質(zhì)控在允許誤差范圍內(nèi)的時限探討，作為臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制的要求。室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)是由實(shí)驗(yàn)室采用一系列的辦法連續(xù)地、客觀地評估實(shí)驗(yàn)室各項的檢測結(jié)果，并發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)本身不易發(fā)現(xiàn)的不準(zhǔn)確性，了解實(shí)驗(yàn)室內(nèi)項目方法之間、不同試劑廠家、不同實(shí)驗(yàn)條件之間的差異，便于校正，使其結(jié)果具有可比性［3］。
任何一種質(zhì)量控制方法都不可能消滅誤差，而只能將誤差控制在一定的、可以被接受的限度之內(nèi)，而這個限度就是測定的允許誤差范圍［4］。在質(zhì)量控制工作中，允許誤差范圍的確定是十分重要的一個環(huán)節(jié)。大家都知道在常規(guī)測定中四個標(biāo)本測定都會有誤差，這個誤差包括各類型的隨機(jī)誤差(RE)和系統(tǒng)誤差(SE)，測定結(jié)果是直接的差異是RE和SE的總和，即總誤差(TE)，可用TE＝1.96S+｜bias｜表示(95%允許誤差限)，所選用的檢測方法的TE必須在臨床可接受的水平范圍內(nèi)，才能用于臨床常規(guī)檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的目的就是通過對質(zhì)控品的檢測來判斷本批次的測定是否在允許總誤差(TEa)之內(nèi)。如在(TEa)之內(nèi)可以將該批次測定結(jié)果發(fā)出，否則必須找出誤差增大的原因，經(jīng)過分析評估或重新測定后才能發(fā)出檢驗(yàn)結(jié)果。通過23項臨床生化學(xué)檢驗(yàn)項目在一次性定標(biāo)后允許誤差范圍時限的研究表明，在12h后變動偏離靶值1.5mmol/L或5%的項目K＋ Na＋ GCU UA ALP AMY，差異有顯著性(P＜0.01)，存在著非隨機(jī)誤差因素，是由于所使用的試劑穩(wěn)定性、檢測學(xué)方法及儀器等因素。K＋、Na＋作為電解質(zhì)的項目要求較高，原來電解質(zhì)的項目大多不在全自動生化儀上測定，而在生化儀上測定，儀器和試劑可能存在一定的問題。另外，酶法的測定包括終點(diǎn)法、二點(diǎn)法、速率法在驗(yàn)測結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)值之間存在著較大的偏差，部分單位參數(shù)設(shè)置不匹配，可能是引起結(jié)果差異的原因之一。ALP測定結(jié)果顯著偏低標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示值，不同試劑的測定結(jié)果偏差較大，這與試劑中緩沖液的組成和種類有著直接關(guān)系。AMy實(shí)驗(yàn)室測定提示可能存在著方法學(xué)上的問題。所以本實(shí)驗(yàn)室K＋ Na＋ GCU UA ALP AMY項目檢測不能超出12h，Cl－ Ca２＋ BUN項目檢測不能超出24h，TP ABL TG CHO ALT TB AST CK GGT CDH CDL應(yīng)據(jù)質(zhì)量控制靶值及允許誤差范圍確定依據(jù)，重新做標(biāo)定，才能保證檢驗(yàn)測定達(dá)到較理想，較穩(wěn)定的條件。
質(zhì)量控制系各實(shí)驗(yàn)室為了監(jiān)測和評價本室內(nèi)工作質(zhì)量，以決定常規(guī)檢驗(yàn)報告能否發(fā)出所采取的一系列檢查、控制手段，旨在檢測和控制本室內(nèi)常規(guī)工作的精密度，并檢測其準(zhǔn)確度的改變，提高本室內(nèi)常規(guī)工作中批間和日間標(biāo)本檢測的一致性。在此推薦的值并不代表合理或理想的測定允許誤差范圍，僅此作為借鑒，已經(jīng)達(dá)到此定標(biāo)方法的實(shí)驗(yàn)室仍應(yīng)提高測定的精密度，爭取不斷縮小本室的允許誤差范圍［4］。由于允許誤差范圍是反映各室檢測精密度的實(shí)際水平的指標(biāo)，不可用推薦值取代本室允許誤差來作為本室室內(nèi)質(zhì)控的依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
1? 張克堅，蘇增留，張傳寶.建立自動化生化分析儀室內(nèi)質(zhì)控時應(yīng)注意的幾個問題.世界醫(yī)療器械，2000，7(6)：10-15.
2? Judy,Robertson.尋求人才與技術(shù)的平行.美全診斷論壇，2004，2，12-14.
3? 鄭懷競.免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控.北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997，3.
4? 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.南京：東南
作者單位 ： 1 529600 廣東陽春，陽春市人民醫(yī)院
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