紫外-可見光譜定性鑒別方法
紫外-可見分光光度法主要適用于不飽和共軛體系化合物的鑒定。定性鑒別對儀器要求高,要常校正,樣品純度可靠。
利用紫外光譜對有機化合物進(jìn)行定性鑒別的主要依據(jù)是多數(shù)有機化合物具有特征吸收光譜,如吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目、各吸收峰的波長位置和相應(yīng)的吸收系數(shù)等。定性分析方法常用比較法,結(jié)構(gòu)完全相同的化合物應(yīng)具完全相同的吸收光譜和特征數(shù)據(jù)。但由于紫外吸收光譜比較簡單,僅與分子結(jié)構(gòu)中發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)等可產(chǎn)生吸收的官能團(tuán)有關(guān),不能表征分子的整體結(jié)構(gòu),所以具有相同的吸收光譜的化合物不一定是同一個化合物。定性鑒別方法有以下幾種。
一、比較吸收光譜
若兩個樣品是同一物質(zhì),其吸收光譜應(yīng)完全一致,利用這一特性,將試樣與已知對照品用同一溶液配制成相同濃度的溶液,分別測定其吸收光譜,然后比較它們的吸收光譜特征,比較光譜圖是否完全一致,還可以利用文獻(xiàn)所記載的標(biāo)準(zhǔn)圖譜進(jìn)行核對。如果兩個吸收光譜完全一致,則可能是同一化合物,如果兩者有差別,則肯定不是同一種化合物。
二、比較吸收光譜的特征數(shù)據(jù)
特征值:λmax ?λmin? λsh ?ε或百分吸收系數(shù)
最大吸收波長λmax是最長用于鑒別的光譜特征數(shù)據(jù)。若樣品化合物有多個吸收峰,并存在谷或肩峰,應(yīng)同時作為鑒別依據(jù)。
具有相同或不同集團(tuán)的不同化合物,可能有相同的λmax,但由于它們的相對分子質(zhì)量不同,所以吸收系數(shù)存在差別,可用作鑒別依據(jù)。如安宮黃體酮和炔諾酮,兩者最大吸收波長相同,但吸收系數(shù)存在差別。
三、比較吸光度(或吸收系數(shù))比值
有些化合物,存在兩個以上的吸收峰,可利用在不同吸收峰(或峰與谷)處測定的吸光度比值A(chǔ)1/A2作為鑒別的依據(jù)。由于測定所用的溶液濃度相同,吸光度比值即為吸收系數(shù)比值,(由A=Ecl可得出,c與l相同)。