熒光法檢測種子實驗
實驗方法原理 植物種子中經(jīng)常存在著許多能夠在紫外線照射下產(chǎn)生熒光的物質(zhì),如某些黃酮類、香豆、素類、酚類物質(zhì)等,在種子衰老過程中,這些熒光物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和成分往往發(fā)生變化,因而熒光的顏色也相應(yīng)改變;有些種子在衰老死亡時,熒光物質(zhì)的性質(zhì)雖未改變,但由于生活力衰退或已死亡的細胞原生質(zhì)透性增大,浸種時,種子中的熒光物質(zhì)很容易外滲。前一種情況可以用直接觀察種胚熒光的方法確定種子死活,后一種情況則可通過觀察熒光物質(zhì)滲出的多少來確定種子死活。
實驗材料 植物種子
儀器、耗材 紫外線熒光燈不產(chǎn)生熒光的白紙刀片鑷子培養(yǎng)皿燒杯
實驗步驟
1.直接觀察法:此法適用于一些松株類、禾谷類及某些薔薇果樹種子,但種間差異較大。
用刀片沿胚的中心線將種子縱切成兩半,取一半放在不產(chǎn)生熒光的白紙上,使種子的切面朝上,放在紫外線熒光燈下照射并進行觀察,記載。有生活力的種子產(chǎn)生明亮的蘭色、蘭紫色、紫色或蘭綠色的熒光,死種子多半是黃色、褐色以至暗淡無光,并帶有多種斑點。
觀察100粒種子,計算出活種子的百分率。
2.紙上熒光法:此法在十字花科種子中效果較好。
(1)將已吸漲的種子100粒,以3-5 M ?M 間隔整齊地排列在培養(yǎng)皿中的雙層潮濕濾紙上,濾紙上的水分以稍有余滴為度,以免水分過多時,熒光物質(zhì)流失。
(2)放置1小時后,令其自然風(fēng)干,于254n M 紫外分析儀照射下觀察。死種子周圍有明亮的蘭色或蘭紫色光圈。
(3)計算活種子的百分率。
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