細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)劃線需要很直嗎
需要。細(xì)胞劃痕最重要的是線盡量畫直,且實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞寬度相近,保證實(shí)驗(yàn)組和對照組可比性。
一般做劃痕實(shí)驗(yàn),一般都在無血清或者低血清狀態(tài)下培養(yǎng)的,否則細(xì)胞增殖就不能忽略按照6孔板背后劃線的垂直方向劃痕,可以形成若干交叉點(diǎn),作為固定的監(jiān)測點(diǎn)。
劃痕實(shí)驗(yàn)是最簡單、經(jīng)濟(jì)的研究細(xì)胞遷移的體外試驗(yàn)方法,其原理是:當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時(shí),在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個(gè)空白區(qū)域,稱為“劃痕”。
劃痕邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。其一定程度上模擬了體內(nèi)細(xì)胞遷移的過程,適合研究細(xì)胞與胞外基質(zhì)(ECM)、細(xì)胞與細(xì)胞之間相互作用引起的細(xì)胞遷移。
一個(gè)要注意的問題,隨著細(xì)胞的不斷遷移,劃痕會(huì)不斷縮小,在計(jì)算不同時(shí)間點(diǎn)劃痕寬度的縮小時(shí),不要計(jì)算其相除的比例值,而是要計(jì)算想減的差值。
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