放射自顯影的操作方法
放射自顯影操作的第一步是制備放射性同位素標(biāo)記的化合物，通常是選用發(fā)射低能β射線的同位素，如14C、3H等。然后，使標(biāo)記化合物被生物組織或細(xì)胞吸收，參加生物代謝。把含有標(biāo)記化合物的組織做成切片，置于載片上，再把切片表面上涂一薄層乳膠，在暗盒中放置一定時(shí)間，進(jìn)行放射性“暴光”。最后按處理照像底片過程，經(jīng)顯影、定影，顯示出被射線還原的銀粒子。由于切片中放射性化合物在位置上與銀粒子沉淀吻合，因而銀粒子可指示出放射性化合物存在的部位。有時(shí)還可對(duì)切片再進(jìn)行染色處理，以使標(biāo)記部位顯示明確。放射自顯影可制做用于光學(xué)顯微鏡觀察的標(biāo)本，也可制做供電子顯微鏡觀察的標(biāo)本，其分辨力約為0.1μm。放射自顯影標(biāo)本處理過程，自涂乳膠步驟開始必須在嚴(yán)密的暗室中進(jìn)行，以免受自然光的干擾，增加本底，降低自顯影效果。
放射自顯影主要用于對(duì)標(biāo)記化合物的分布和動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行追蹤。放射自顯影也是基因定位的一種重要手段，即所謂的原位雜交技術(shù)。RNA與為其編碼的DNA順序（基因）在分子水平上具有堿基配對(duì)的互補(bǔ)關(guān)系，因而可以互相結(jié)合，形成DNA-RNA分子雜交體。如果把帶有放射性標(biāo)記的RNA與細(xì)胞切片相互作用，RNA即可結(jié)合到染色體中與其互補(bǔ)的DNA片斷上，把這種切片經(jīng)放射自顯影處理，即顯示出了該RNA基因存在的具體染色體部位，為遺傳學(xué)和基因工程提供有價(jià)值的資料。
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