巴馬汀提取及延胡索素制備的方法
| 實(shí)驗材料 | |
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| 試劑、試劑盒 | |
| 儀器、耗材 |
巴馬汀為季銨生物堿，溶于水和極性大的有機(jī)溶劑（如甲醇、乙醇等）所以可用甲醇、乙醇或水進(jìn)行提取。然后通過鹽析，降低其在水中的溶解度而沉淀，與其它雜質(zhì)分離。巴馬汀是有機(jī)堿，盡管它帶正電荷，但和水的親和力仍小于NaCl，NaCl和水的強(qiáng)親和力，降低了巴馬汀在水中的溶解度，使它被“擠”出。
1．工藝
（1）提?。狐S藤粗粉20g，用95%EtOH回流提取2次，每次1小時，乙醇用量為100ml，合并二次醇提取液，濃縮至3~4ml，用吸管轉(zhuǎn)移到5ml小錐形瓶中，放置，析晶，抽濾得巴馬汀粗晶。
（2）分離：將巴馬汀粗晶用10ml水溶解后，抽濾。不溶物主要為黃藤內(nèi)酯。濾液滴加 HCl至PH2，再加10%NaCl進(jìn)行鹽析放置，析出黃色不溶物，抽濾得氯化巴馬汀粗晶。
（3）精制：用70%EtOH熱溶氯化巴馬汀粗晶，過濾，濾液析晶，抽濾，得精制氯化巴馬汀。干燥稱重——克，測溶點(diǎn)——℃。
（4）氫化：精制氯化巴馬汀用50%甲醇溶液，加入因體KBH2約0.2g，直到甲醇液迅速由黃變白或微黃色。滴加HCl至PH2并加熱使多余的KBH4分解，再趁熱滴加NH4OH使反應(yīng)液呈堿性，立即析出鱗片狀四氫巴馬汀粗晶，抽濾得結(jié)晶，紅外線燈下干燥，再用EtOH-H2O重結(jié)晶，得精制四氫巴馬汀。干燥稱重 —— 克，薄層層析檢查純度。熔點(diǎn)—— ℃。
2．巴馬汀原位還原反應(yīng)
在硅膠CMC- Na薄層板的起始線上點(diǎn)自制的巴馬汀乙醇液，及對照品巴馬汀乙醇液及四氫巴馬汀乙醇液。然后再在自制的巴馬汀的原點(diǎn)加點(diǎn)2%KBH4甲醇液2~3次，吹干，氨缸中飽和后，以CHCl2OH(3:1)展開，改良碘化鉍鉀試液顯色。巴馬汀Rf值0.4左右，四氫巴馬汀Rf值約0.9，進(jìn)行原位反應(yīng)的巴馬汀如氫化徹底，應(yīng)和對照品氫巴馬汀的Rf值一致，如反應(yīng)不徹底則出現(xiàn)二個斑點(diǎn)，其Rf值分別與對照品巴馬汀及四氫巴馬汀一致。
黃藤中生成堿的檢識：
1．生物堿沉淀反應(yīng)
取黃藤的15醋酸浸出液每份1ml，置小試管中，分別滴加下列各試劑2~3滴，觀察并記錄有無沉淀產(chǎn)生及顏色變化。
（1）碘化鉍鉀試劑
（2）硅鎢酸試劑
（3）苦味酸試劑（樣品液需調(diào)至中性）
（4）鞣酸試劑
2．薄層層析
硅膠-CMC- Na薄層
樣品 巴馬汀，小檗堿，藥根堿，延胡索乙素，制備巴馬汀后的母液，鹽析后的水母液展開劑氯仿-甲醇（3：1），展開前薄層板先在氨缸中飽和5分鐘。
顯色 先在紫外燈下觀察螢光下觀察螢光，然后再噴以改良碘經(jīng)鉍鉀試液顯色如果用中性或堿性氧化鋁薄層，展開劑可用氯仿。
記錄：薄層層析圖譜。說明各母液中還有什么化合物。
