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怎么分析PCR電泳圖

2022.11.25

分析PCR電泳圖:

1. 首先需要的是marker,即有既定片段長(zhǎng)度的DNA片段。

2. 看膠,里點(diǎn)樣孔越近的DNA片段長(zhǎng)度越大,離點(diǎn)樣孔遠(yuǎn)的DNA片段長(zhǎng)度小。以圖片看,5.6兩個(gè)孔的片段比前邊4個(gè)孔的片段短,如果你知道前邊4個(gè)孔的片段長(zhǎng)度,可以估計(jì)一下。

條帶上方的模糊的一片應(yīng)該是引物二聚體來(lái)的。做連接或者其他操作前用PCR產(chǎn)物回收試劑盒回收一下,就可以去掉引物二聚體了。

image.png

PCR電泳原理:

PCR電泳PCR電泳主要是瓊脂糖凝膠電泳。電泳儀有正負(fù)極的,而DNA是帶負(fù)電荷的。故而向正方向移動(dòng)。

然后DNA里是有堿基的。堿基可以吸收紫外光。最重要的是有染色劑,常用的有溴化乙錠等等。一般在配制凝膠的時(shí)候會(huì)加進(jìn)去,或者跑完電泳然后將凝膠浸在含有染色劑的溶液里,染色劑可以插入DNA鏈中。在可見(jiàn)光下是看不見(jiàn)條帶的,但在紫外光照射下就能出現(xiàn)條帶。


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