峰面積歸一法、內標法、外標法區(qū)別
色譜定量分析方法可以分為外標法、內標法、歸一化法三大類。當能夠精確進樣量的時候,通常采用外標法進行定量。這種方法標準物質單獨進樣分析,從而確定待測組分的校正因子;實際樣品進樣分析后依據(jù)此校正因子對待測組分色譜峰進行計算得出含量。其特點是標準物質和未知樣品分開進樣,雖然看上去是二次進樣,但實際上未知樣品只需要一次進樣分析就能得到結果。外標法的優(yōu)點是操作簡單,不需要前處理。缺點是要求精確進樣,進樣量的差異直接導致分析誤差的產(chǎn)生。外標法是最常用的定量方法,其計算過程如下:
1.絕對校正因子gi的計算
gi=ms/Ai
式中ms是標準樣品中組分i的含量,Ai是標準樣品譜圖中組分i的峰面積。
2.外標法的計算公式
mi=Ai?*?gi
這里mi是未知樣品中組分i的含量。
(相對校正因子是某組分的絕對校正因子與標準物質絕對校正因子的商。計算公式如下:
Gi=gi/gs
式中gi是組分i的絕對校正因子,gs是標準物質的絕對校正因子。
對同一類型的不同檢測器來說,在組分i和s相同的情況下,相對校正因子是基本一致的。它只和檢測器的性能、待測組分的性質、標準物質的性質、載氣的性質相關,與操作條件無關。也就是說基本上可是認為相對校正因子Gi是一個常數(shù)。相對校正因子在好多相關文獻上可以查到,在無法找到所有組分標準樣品的時候,可以參考使用。但是由于不同檢測器的性能有一定的差異,因此相對校正因子最好在使用的色譜上單獨測定)
歸一化法有時候也被稱為百分法(percent),不需要標準物質幫助來進行定量。它直接通過峰面積或者峰高進行歸一化計算從而得到待測組分的含量。其特點是不需要標準物,只需要一次進樣即可完成分析。
歸一化法兼具內標和外標兩種方法的優(yōu)點,不需要精確控制進樣量,也不需要樣品的前處理;缺點在于要求樣品中所有組分都出峰,并且在檢測器的響應程度相同,即各組分的絕對校正因子都相等。
選擇適宜的物質作為預測組分的參比物,定量加到樣品中去,依據(jù)欲測定組分和參比物在檢測器上的響應值(峰面積或峰高)之比和參比物加入量進行定量分析的方法叫內標法。特點是標準物質和未知樣品同時進樣,一次進樣。內標法的優(yōu)點在于不需要精確控制進樣量,由進樣量不同造成的誤差不會帶到結果中。缺陷在于內標物很難尋找,而且分析操作前需要較多的處理過程,操作復雜,并可能帶來誤差。
一個合適的內標物應該滿足以下要求:能夠和待測樣品互溶;出峰位置不和樣品中的組分重疊;易于做到加入濃度與待測組分濃度接近;譜圖上內標物的峰和待測組分的峰接近。