封閉液中1%的BSA是怎么配制
取1g BSA,加蒸餾水,定容到100ml就行了。
最常用的封閉劑是0.05%-0.5%的BSA,封閉是否必要,取決于ELISA的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。并非所有的ELISA 固相均需封閉,封閉不當(dāng)反而會(huì)使陰性本底增高。
一般說(shuō)來(lái),雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌徹底,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。
特別是用單抗腹水直接包被,因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類似封閉劑的作用。但在間接法測(cè)定中,封閉一般是不可少的。
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