酶標(biāo)儀基本知識(shí)及其檢測(cè)原理
酶標(biāo)儀基本知識(shí)及其檢測(cè)原理，文章簡(jiǎn)要介紹了酶標(biāo)儀的原理和及應(yīng)用。
光是電磁波，波長(zhǎng)100nm-400nm稱為紫外光，400nm-780nm之間的光可被人眼觀察到
，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物
體上反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因?yàn)橹参镂樟斯庵械募t色光譜。酶標(biāo)
儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下，檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。
酶標(biāo)儀檢測(cè)單位：
酶標(biāo)儀光通過被檢測(cè)物，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長(zhǎng)下
，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。?
酶標(biāo)儀檢測(cè)單位用OD值表，OD是opticaldelnsity（光密度）的縮寫，表示被檢
測(cè)物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bo
uger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度下述系：
E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度，Ⅰ0為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度，Ⅰ為從
被檢測(cè)物出來的光強(qiáng)度。
OD值由下述公式計(jì)算：
E=OD=C×D×E
其中：C為檢測(cè)物的濃度；D為檢測(cè)物的厚度；E為摩爾子。
在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng)，在此波長(zhǎng)下，此物質(zhì)能夠吸收zui
多的光能量。如果選擇其它的波長(zhǎng)段，就會(huì)造檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。此，在測(cè)定
檢測(cè)物時(shí)，我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，稱為測(cè)量波長(zhǎng)。
但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收
，我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng)，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長(zhǎng)下，檢測(cè)物光的吸
收zui小。檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
酶標(biāo)儀檢測(cè)值計(jì)算
酶標(biāo)儀中的檢測(cè)器接收透過被檢測(cè)物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號(hào)，zui大為40
95.酶標(biāo)儀定義沒有光源下的透光值為0%，沒有檢測(cè)物的透光值為100%。則實(shí)際檢
測(cè)中，檢測(cè)物的透光值均在0%一100%之間。
酶標(biāo)儀透光值的計(jì)算如下：
T=（Meas-Min）/（Max-Min）
其中T為透光值，Meas為檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值，Min為在0%的情下檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值
，Max為在100%的情況下檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值，舉例如下：
酶標(biāo)儀的中心定位
酶標(biāo)儀會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)儀酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)儀酶標(biāo)孔底的
凸凹引起的厚薄不均帶來檢測(cè)的不準(zhǔn)確。在對(duì)每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，儀器其實(shí)
要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測(cè)量，選取zui中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。
酶標(biāo)儀光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
酶標(biāo)儀的用途和其它提示
酶標(biāo)儀用于ELISA試劑的測(cè)定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。
酶標(biāo)儀質(zhì)量控制
酶標(biāo)儀質(zhì)量控制是試劑檢測(cè)的重要因素。請(qǐng)按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。
酶標(biāo)儀空白校正
有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來
設(shè)置的，請(qǐng)按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。
酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的解釋
由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測(cè)的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)儀酶標(biāo)板，檢測(cè)試劑的體積
，都會(huì)造成OD值的不，因此，只有使用同一酶標(biāo)儀酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測(cè)結(jié)果才能
比較和分析。對(duì)結(jié)果的臨床解釋請(qǐng)依照試劑盒的說明書進(jìn)行。
-
技術(shù)原理
-
焦點(diǎn)事件
-
焦點(diǎn)事件
