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【快檢】農(nóng)藥殘留快速檢測儀器的原理及使用指導(dǎo)

2021.6.26

  食用農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留快速檢測標(biāo)準(zhǔn)有哪些?

 ?。?)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》。

 ?。?)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 448《蔬菜上有機磷和三基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法》。

  有機磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的作用機理是什么?

  有機磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲神經(jīng)中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累,影響正常傳導(dǎo),使昆蟲中毒致死。如果存在有機磷農(nóng)藥,就與膽堿酯酶結(jié)合,膽堿酯酶就不能分解乙酰膽堿為乙酸和膽堿,造成乙酰膽堿在神經(jīng)肌接頭和體內(nèi)其他部位的過量積聚,引起一系列神經(jīng)中毒癥狀。

  農(nóng)藥殘留快速檢測--酶抑制分光光度法的原理是什么?

  乙酰膽堿酶水解后,水解 產(chǎn)物可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色。有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值,計算出抑制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

  為什么在測同一株蔬菜的不同部位農(nóng)藥殘留時結(jié)果不一樣?

  研究表明,農(nóng)藥在蔬菜中的殘留并不是均勻分布的,一般葉面上的農(nóng)藥殘留量會比根莖部位的高,而菜葉尖部的農(nóng)藥殘留又比葉面上的其他部位高。一些含有果蒂的蔬菜其蒂部的農(nóng)藥殘留會明顯高于其他部位。因此,同一株蔬菜的不同部位所測的農(nóng)藥殘留結(jié)果不一定完全相同。所以在抽樣時,應(yīng)放大采樣源的總量,并選擇有代表性的部位進行測量,抽多株蔬菜取其葉尖部位進行檢測,而不是取某一株進行檢測。

  農(nóng)藥殘留快速檢測儀有什么優(yōu)缺點?

  優(yōu)點:操作簡單方便,快捷,成本低,整個檢測過程只需30分鐘左右,它可以作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補充,針對市場、農(nóng)場蔬菜農(nóng)藥殘留量進行快速篩選監(jiān)測,保證上市蔬菜食用的相對安全性。

  缺點:酶試劑易失活,導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定,檢測結(jié)果誤差大,重復(fù)性不好,實際應(yīng)用中的確認(rèn)率為60%-70%;存在檢測盲區(qū),部分設(shè)備只能檢測有機磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥,不能檢測有機氯、菊酯類和其他類別的農(nóng)藥;不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等容易出現(xiàn)假陽性的農(nóng)產(chǎn)品;需要對檢測人員進行專門培訓(xùn),否則將會對出現(xiàn)的問題無法正確處理或判斷,得出錯誤的結(jié)果。

   上機測試時為什么一定要調(diào)零?

  因為農(nóng)藥殘留檢測儀是光、電、機綜合性的儀器,尤其是光,很容易受到外在環(huán)境的影響,比如供電電壓、磁性等。調(diào)零,主要是讓儀器進入不受干擾的良好狀態(tài)下進行運行,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  使用農(nóng)藥殘留快速檢測儀是否每次檢測都需要做對照?

  一般而言,對照不需要每次都做,對照做成功以后,幾天內(nèi)其他的樣品檢測可共用該對照值進行計算,有些農(nóng)藥殘留檢測儀器要求每次重新開機后都要進行對照測試,具體需要參考儀器的相關(guān)說明。但是,有以下因素變化時必須重新進行對照測試:

  (1)緩沖液、酶、顯色劑、底物的變更;

  (2)操作人員的變動(主要指加腋及測試的人員);

  (3)實驗場所的變化(包括場地、環(huán)境、溫度的變化);

 ?。?)實驗方法的變動;

 ?。?)主要設(shè)備的變更(如移液器、檢測儀器等);

 ?。?)檢測現(xiàn)場環(huán)境溫度頻繁大幅度波動;

 ?。?)試劑被污染;

  (8)其他可能影響檢測結(jié)果的變化因素;

  農(nóng)藥殘留快速檢測試劑中的檢驗用水(溶解緩沖劑和配制底物的水)能用自來水或者礦泉水代替嗎?

  自來水一般都經(jīng)過消毒處理,含有消毒劑以及其他的對酶活性可能產(chǎn)生影響的成分。礦泉水含有大量的離子也會對測定結(jié)果造成干擾。因此,不宜采用自來水或礦泉水作為檢驗用水,宜用蒸餾水、去離子水、純凈水作為檢驗用水。

  樣品測定出現(xiàn)抑制率為0的結(jié)果正常嗎?

  有時出現(xiàn)樣品抑制率為0的現(xiàn)象是正常的,但全部樣品都是0時,就需要查找原因。原因有以下幾點:

 ?。?)儀器使用不當(dāng);在做樣品的同時,要做對照。對于對照和樣品同時測定的儀器,對照多放在速測儀的第一通道,如果把樣品放入本該放對照的通道,就會出現(xiàn)扣除對照時,把樣品抑制率扣掉了,而當(dāng)該樣品抑制率太高時,后面的樣品會出現(xiàn)抑制率為0的現(xiàn)象。

  (2)試劑過期;酶活性低會出現(xiàn)抑制率為0的現(xiàn)象。

 ?。?)操作錯誤;速測儀的試劑總共4種,按順序添加,但當(dāng)樣品多時,有時會出現(xiàn)一個未添加,而下一個加兩回的現(xiàn)象,如底物多加導(dǎo)致抑制率為0。

 ?。?)取樣時,所取菜葉表面殘留較多清水。

 ?。?)樣品測試時,加完樣品浸泡液后沒有靜置10分鐘,反應(yīng)時間太短。

 ?。?)試劑的用量不準(zhǔn)確,或移液器的用法不正確,導(dǎo)致試劑的加入量不準(zhǔn)確。

  農(nóng)藥殘留快速檢測儀的使用有哪些注意事項?

  (1)目前,國內(nèi)外采用的分光光度法測定農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留時,蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄的汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(包括含葉綠素較高的蔬菜),不要剪得太碎。測定番茄時,可將提取液放在果蒂處浸泡2分鐘,取浸泡液測定。測定韭菜或大蒜時,可整根或整顆粒放入容器中,加入提取液后振搖提取測定。

  (2)待測樣品加入底物之后,應(yīng)馬上搖勻,放入測定儀,否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

 ?。?)酶抑制法最關(guān)鍵的試劑是酶,酶的活性降低或失去活性時就會出現(xiàn)假陽性,空白對照測試3分鐘的吸光光度變化值△A0應(yīng)在0.3以上;

  農(nóng)藥殘留快速檢測試劑的使用有哪些注意事項?

 ?。?)試劑應(yīng)存放在4℃的冰箱內(nèi),緩沖劑(液)放置于室溫環(huán)境中保存即可。保質(zhì)期一般為12個月;

 ?。?)留意對照值檢查酶活性,正?;钚浴鰽0為0.4~0.8;

 ?。?)在有效期內(nèi)使用,任何試劑使用時,用一瓶打開一瓶,用完后才使用新的,防止變質(zhì);

  (4)器具專用原則;任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽,單獨使用,以免交叉污染。

 ?。?)試劑只出不入原則;測試時,從任何試劑瓶吸出的試劑,禁止再次注射回試劑瓶。

  (6)環(huán)境溫度對測試的影響,當(dāng)環(huán)境溫度過低時,測試時需作必要的保溫措施。

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