【快檢】農(nóng)藥殘留快速檢測儀器的原理及使用指導(dǎo)
食用農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留快速檢測標(biāo)準(zhǔn)有哪些？
?。?）國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》。
?。?）行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 448《蔬菜上有機(jī)磷和三基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法》。
有機(jī)磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的作用機(jī)理是什么？
有機(jī)磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲神經(jīng)中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性，造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導(dǎo)，使昆蟲中毒致死。如果存在有機(jī)磷農(nóng)藥，就與膽堿酯酶結(jié)合，膽堿酯酶就不能分解乙酰膽堿為乙酸和膽堿，造成乙酰膽堿在神經(jīng)肌接頭和體內(nèi)其他部位的過量積聚，引起一系列神經(jīng)中毒癥狀。
農(nóng)藥殘留快速檢測--酶抑制分光光度法的原理是什么？
乙酰膽堿酶水解后，水解 產(chǎn)物可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
為什么在測同一株蔬菜的不同部位農(nóng)藥殘留時結(jié)果不一樣？
研究表明，農(nóng)藥在蔬菜中的殘留并不是均勻分布的，一般葉面上的農(nóng)藥殘留量會比根莖部位的高，而菜葉尖部的農(nóng)藥殘留又比葉面上的其他部位高。一些含有果蒂的蔬菜其蒂部的農(nóng)藥殘留會明顯高于其他部位。因此，同一株蔬菜的不同部位所測的農(nóng)藥殘留結(jié)果不一定完全相同。所以在抽樣時，應(yīng)放大采樣源的總量，并選擇有代表性的部位進(jìn)行測量，抽多株蔬菜取其葉尖部位進(jìn)行檢測，而不是取某一株進(jìn)行檢測。
農(nóng)藥殘留快速檢測儀有什么優(yōu)缺點(diǎn)？
優(yōu)點(diǎn)：操作簡單方便，快捷，成本低，整個檢測過程只需30分鐘左右，它可以作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補(bǔ)充，針對市場、農(nóng)場蔬菜農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速篩選監(jiān)測，保證上市蔬菜食用的相對安全性。
缺點(diǎn)：酶試劑易失活，導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定，檢測結(jié)果誤差大，重復(fù)性不好，實(shí)際應(yīng)用中的確認(rèn)率為60%-70%；存在檢測盲區(qū)，部分設(shè)備只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥，不能檢測有機(jī)氯、菊酯類和其他類別的農(nóng)藥；不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等容易出現(xiàn)假陽性的農(nóng)產(chǎn)品；需要對檢測人員進(jìn)行專門培訓(xùn)，否則將會對出現(xiàn)的問題無法正確處理或判斷，得出錯誤的結(jié)果。
上機(jī)測試時為什么一定要調(diào)零？
因?yàn)檗r(nóng)藥殘留檢測儀是光、電、機(jī)綜合性的儀器，尤其是光，很容易受到外在環(huán)境的影響，比如供電電壓、磁性等。調(diào)零，主要是讓儀器進(jìn)入不受干擾的良好狀態(tài)下進(jìn)行運(yùn)行，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
使用農(nóng)藥殘留快速檢測儀是否每次檢測都需要做對照？
一般而言，對照不需要每次都做，對照做成功以后，幾天內(nèi)其他的樣品檢測可共用該對照值進(jìn)行計(jì)算，有些農(nóng)藥殘留檢測儀器要求每次重新開機(jī)后都要進(jìn)行對照測試，具體需要參考儀器的相關(guān)說明。但是，有以下因素變化時必須重新進(jìn)行對照測試：
?。?）緩沖液、酶、顯色劑、底物的變更；
?。?）操作人員的變動（主要指加腋及測試的人員）；
（3）實(shí)驗(yàn)場所的變化（包括場地、環(huán)境、溫度的變化）；
?。?）實(shí)驗(yàn)方法的變動；
?。?）主要設(shè)備的變更（如移液器、檢測儀器等）；
?。?）檢測現(xiàn)場環(huán)境溫度頻繁大幅度波動；
?。?）試劑被污染；
?。?）其他可能影響檢測結(jié)果的變化因素；
農(nóng)藥殘留快速檢測試劑中的檢驗(yàn)用水（溶解緩沖劑和配制底物的水）能用自來水或者礦泉水代替嗎？
自來水一般都經(jīng)過消毒處理，含有消毒劑以及其他的對酶活性可能產(chǎn)生影響的成分。礦泉水含有大量的離子也會對測定結(jié)果造成干擾。因此，不宜采用自來水或礦泉水作為檢驗(yàn)用水，宜用蒸餾水、去離子水、純凈水作為檢驗(yàn)用水。
樣品測定出現(xiàn)抑制率為0的結(jié)果正常嗎？
有時出現(xiàn)樣品抑制率為0的現(xiàn)象是正常的，但全部樣品都是0時，就需要查找原因。原因有以下幾點(diǎn)：
?。?）儀器使用不當(dāng)；在做樣品的同時，要做對照。對于對照和樣品同時測定的儀器，對照多放在速測儀的第一通道，如果把樣品放入本該放對照的通道，就會出現(xiàn)扣除對照時，把樣品抑制率扣掉了，而當(dāng)該樣品抑制率太高時，后面的樣品會出現(xiàn)抑制率為0的現(xiàn)象。
?。?）試劑過期；酶活性低會出現(xiàn)抑制率為0的現(xiàn)象。
（3）操作錯誤；速測儀的試劑總共4種，按順序添加，但當(dāng)樣品多時，有時會出現(xiàn)一個未添加，而下一個加兩回的現(xiàn)象，如底物多加導(dǎo)致抑制率為0。
?。?）取樣時，所取菜葉表面殘留較多清水。
?。?）樣品測試時，加完樣品浸泡液后沒有靜置10分鐘，反應(yīng)時間太短。
?。?）試劑的用量不準(zhǔn)確，或移液器的用法不正確，導(dǎo)致試劑的加入量不準(zhǔn)確。
農(nóng)藥殘留快速檢測儀的使用有哪些注意事項(xiàng)？
（1）目前，國內(nèi)外采用的分光光度法測定農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留時，蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄的汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時（包括含葉綠素較高的蔬菜），不要剪得太碎。測定番茄時，可將提取液放在果蒂處浸泡2分鐘，取浸泡液測定。測定韭菜或大蒜時，可整根或整顆粒放入容器中，加入提取液后振搖提取測定。
?。?）待測樣品加入底物之后，應(yīng)馬上搖勻，放入測定儀，否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
?。?）酶抑制法最關(guān)鍵的試劑是酶，酶的活性降低或失去活性時就會出現(xiàn)假陽性，空白對照測試3分鐘的吸光光度變化值△A0應(yīng)在0.3以上；
農(nóng)藥殘留快速檢測試劑的使用有哪些注意事項(xiàng)？
?。?）試劑應(yīng)存放在4℃的冰箱內(nèi)，緩沖劑（液）放置于室溫環(huán)境中保存即可。保質(zhì)期一般為12個月；
?。?）留意對照值檢查酶活性，正?；钚浴鰽0為0.4～0.8；
?。?）在有效期內(nèi)使用，任何試劑使用時，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止變質(zhì)；
?。?）器具專用原則；任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽，單獨(dú)使用，以免交叉污染。
?。?）試劑只出不入原則；測試時，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。
（6）環(huán)境溫度對測試的影響，當(dāng)環(huán)境溫度過低時，測試時需作必要的保溫措施。
-
科技前沿
-
精英視角
