轉(zhuǎn)基因技術(shù)-核顯微注射法簡介
核顯微注射法是動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中最常用的方法。它是在顯微鏡下將外源基因注射到受精卵細(xì)胞的原核內(nèi),注射的外源基因與胚胎基因組融合,然后進行體外培養(yǎng),最后移植到受體母畜子宮內(nèi)發(fā)育,這樣分娩的動物體內(nèi)的每一個細(xì)胞都含有新的DNA片段。-這種方法的缺點是效率低、位置效應(yīng)(外源基因插入位點隨機性)造成的表達結(jié)果的不確定性、動物利用率低等,在反芻動物還存在著繁殖周期長,有較強的時間限制、需要大量的供體和受體動物等特點。
詳細(xì)步驟:在顯微鏡下,用一根極細(xì)的玻璃針(直徑1-2微米)直接將DNA注射到胚胎的細(xì)胞核內(nèi),再把注射過DNA的胚胎移植到動物體內(nèi),使之發(fā)育成正常的幼仔。用這種方法生產(chǎn)的動物約有十分之一是整合外源基因的轉(zhuǎn)基因動物。
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