高效液相色譜法常用的定量方法--內(nèi)標(biāo)法
內(nèi)標(biāo)法
按品種正文項(xiàng)下的規(guī)定,精密稱(量)取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì),分別配成溶液,各精密量取適量,混合配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液。取一定量進(jìn)樣,記錄色譜圖。測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高,按下式計(jì)算校正因子:
式中 AS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高;
AR為對(duì)照品的峰面積或峰高;
cs為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度;
cR為對(duì)照品的濃度。
再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液,進(jìn)樣,記錄色譜圖,測(cè)量供試品中待測(cè)成分和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高,按下式計(jì)算含量:
式中 Ax為供試品的峰面積或峰高;
Cx為供試品的濃度;
A's為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高;
c's為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度;
f為內(nèi)標(biāo)法校正因子。
采用內(nèi)標(biāo)法,可避免因樣品前處理及進(jìn)樣體積誤差對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。