用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定苯甲酸
目的與要求1、掌握吸收曲線的測(cè)定與繪制方法 2、掌握直接比較法定量的方法 3、熟悉紫外分光光度計(jì)的使用方法 原理樣品中的苯甲酸在酸性條件下可用水蒸氣蒸餾法提取，在堿性條件下形成苯甲酸鹽。苯甲酸及其鹽對(duì)紫外光有選擇性吸收，其吸收光譜的最大吸收波長(zhǎng)在225nm左右。 用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可測(cè)定物質(zhì)在紫外光區(qū)、可見(jiàn)光區(qū)的吸收光譜，并可定量測(cè)定。 儀器與試劑1、儀器 751型分光光度計(jì)；1cm石英吸收池一套；50ml容量瓶二只；刻度吸管5ml、10ml各一只；滴管一只。 2、試劑 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1ml相當(dāng)于0.1mg苯甲酸）；0.1mol/L、0.01mol/L氫氧化鈉溶液。 操作步驟操作步驟1、苯甲酸吸收曲線的繪制 取苯甲酸儲(chǔ)備液4.00ml，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/L氫氧化鈉溶液定容，搖勻。此液1ml相當(dāng)于8μg苯甲酸。 測(cè)定條件：氫燈，1cm石英比色皿，0.01mol/L氫氧化鈉為參比測(cè)定波長(zhǎng)：從210nm-240nm每隔一定波長(zhǎng)（2nm-5nm）測(cè)定一次吸光度，在225nm左右隔1nm測(cè)定一次吸光度。繪制苯甲酸的紫外吸收曲線，得最大吸收波長(zhǎng)為測(cè)定波長(zhǎng)。2、直接比較法測(cè)定樣品溶液中苯甲酸的含量取10.00ml樣品溶液，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/L氫氧化鈉溶液定容，搖勻后備用。 以0.01mol/L氫氧化鈉溶液為參比溶液，在完全相同的條件下測(cè)定苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液和稀釋好的樣品溶液的吸光度值。3、結(jié)果處理 按下式計(jì)算樣品溶液中苯甲酸的濃度： Cx (μg/ml) = 8×50×Ax /(10As) Cx:待測(cè)樣品液的濃度；Ax是待測(cè)樣品溶液的吸收值；As是苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)液的吸收值。
