紫外吸收光譜的定量計算公式
A=ECL C=A/EL
A為吸收度;T為透光率;E為吸收系數(shù),采用的表示方法是(E1%1cm),其物理意義為當溶液濃度為1%(g/ml),液層厚度為1cm時的吸收度數(shù)值;C為100ml溶液中所含被測物質(zhì)的重量(按干燥品或無水物計算),g;L為液層厚度,cm。
紫外-可見分光光度法是在190~800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度,用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定的方法。當光穿過被測物質(zhì)溶液時,物質(zhì)對光的吸收程度隨光的波長不同而變化。因此,通過測定物質(zhì)在不同波長處的吸光度,并繪制其吸光度與波長的關(guān)系圖即得被測物質(zhì)的吸收光譜。從吸收光譜中,可以確定最大吸收波長λmax和最小吸收波長λmin。物質(zhì)的吸收光譜具有與其結(jié)構(gòu)相關(guān)的特征性。因此,可以通過特定波長范圍內(nèi)樣品的光譜與對照光譜或?qū)φ掌饭庾V的比較,或通過確定最大吸收波長,或通過測量兩個特定波長處的吸收比值而鑒別物質(zhì)。用于定量時,在最大吸收波長處測量一定濃度樣品溶液的吸光度,并與一定濃度的對照溶液的吸光度進行比較或采用吸收系數(shù)法求算出樣品溶液的濃度。
原理可見光、紫外線照射某些物質(zhì),主要是由于物質(zhì)分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收,而產(chǎn)生化合物的可見紫外吸收光譜?;谖镔|(zhì)對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎(chǔ)。
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技術(shù)原理