食品中合成著色劑的快速測(cè)定
1、方法原理??
食品中的合成著色劑,在特定的緩沖溶液中,在滴汞電極上可產(chǎn)生敏感的極譜波,波高與著色劑的濃度成正比。當(dāng)食品中存在一種或兩種以上互不影響測(cè)定的著色劑時(shí),可與標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行比較定性、定量?，F(xiàn)代化的微機(jī)極譜儀,操作比較簡(jiǎn)單,結(jié)果準(zhǔn)確,分析速度快。
2、儀器??
微機(jī)極譜儀。
3、試劑
(1)底液 A:磷酸鹽緩沖液(可用于紅色和黃色復(fù)合色素),可作菜紅、胭脂紅、日落黃、檸檬黃以及靛藍(lán)著色劑的測(cè)定底液。稱取13.6g 無(wú)水磷酸二氫鉀(KH2PO4)和14.1g 無(wú)水磷酸氫二鈉(Na2HPO4)[或35.6g 含結(jié)晶水的磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)]及10.0g 氯化鈉,加水溶解后稀釋至1L。
(2)底液 B:乙酸鹽緩沖液(可用于綠色和藍(lán)色復(fù)合色素),可作靛藍(lán)、亮藍(lán)、檸檬黃、日落黃著色劑的測(cè)定底液。量取40.0m 冰乙酸,加水約400mL,加入20.0g 無(wú)水乙酸鈉,溶解后加水稀釋至1L。
(3)1.00mg/mL 著色劑標(biāo)準(zhǔn)溶液和10.0μg/mL 著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。
4、樣品處理
(1)飲料和酒類? 取樣10.0～25.0mL 加熱驅(qū)除 CO2?和乙醇,冷卻后用200g/L NaOH 和 HCl(1+1)校至中性,然后加蒸餾水至原體積。
(2)表層色素類? 取樣5.0～10.0g,用蒸餾水反復(fù)漂洗直至色素完全被洗脫。合并洗脫液并定容至一定體積。
(3)水果糖和果凍類? 取樣5.0g,用水加熱溶解,冷卻后定容至25.0mL。
5、測(cè)定
(1)極譜條件? 滴汞電極,一階導(dǎo)數(shù),三電極制,掃描速度250mV/s,底液 A 的初始掃描電位-0.2V,終止掃描電位-0.9V,參考峰電位為莧菜紅-0.42V、日落黃-0.50V、檸檬黃-0.56V、胭脂紅-0.69V、靛藍(lán)-0.29V。底液B的初始掃描電位0.0V,終止掃描電位-1.0V,參考峰電位(溶液、底液偏酸使出峰電位正移,偏堿使出峰電位負(fù)移)為靛藍(lán)-0.16V、日落黃-0.32V、檸檬黃-0.45V、亮藍(lán)-0.80V。
(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作? 吸取著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0,0.50mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL 分別于10mL 比色管中,加入5.00mL 底液,用水定容至10.0mL(濃度分別為0,0.50μg/mL,1.00μg/mL,2.0μg/mL,3.00g/mL,4.00g/mL,0為試劑空白溶液)?；靹蚝笥跇O譜儀上測(cè)定。
(3)樣品測(cè)定? 取樣品處理液1.00mL,或一定量(復(fù)合色素峰電位較近時(shí),盡量取稀溶液),加底液5.00mL,加水至10.00mL,搖勻后與標(biāo)準(zhǔn)系列溶液同時(shí)測(cè)定。記錄樣品峰高,用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品中著色劑的含量。
6、注釋
(1)方法檢出限與線性范圍? 合成著色劑的檢出限一般可達(dá)到0.2μg/mL。標(biāo)準(zhǔn)曲線建立在0.20～5.00μg/mL 范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,r值一般可達(dá)到0.999。
(2)方法穩(wěn)定性? 將標(biāo)準(zhǔn)使用液和樣品測(cè)定液室溫放置30h(>30h未作),在汞瓶高度不變的情況下,其峰電位與峰高基本不變。底液室溫放置6個(gè)月,磷酸鹽底液中會(huì)出現(xiàn)少許絮狀物,但對(duì)測(cè)定無(wú)影響。
(3)混合著色劑的極譜圖? 取磷酸鹽底液或乙酸鹽底液5mL,置10mL 比色管中,用微量注射器注入多種著色劑,用水稀釋到10mL,使各著色劑的含量為0.50μg/mL,1.00μg/mL,2.00μg/mL,3.00ug/mL,在極譜儀上測(cè)定后由微機(jī)自動(dòng)做出極譜圖,見(jiàn)下面兩圖。磷酸鹽底液適合于紅色和黃色復(fù)合色素,可作莧菜紅、胭脂紅、日落黃、檸檬黃以及靛藍(lán)著色劑的測(cè)定底液。乙酸鹽底液適合于綠色和藍(lán)色復(fù)合色素,可作靛藍(lán)、亮藍(lán)、檸檬黃、日落黃著色劑的測(cè)定底液。當(dāng)測(cè)定一個(gè)未知著色劑的樣品時(shí),可采用圖譜掃描的方式進(jìn)行定性。
(4)著色劑間的影響? 單一著色劑或兩種以上的著色劑其出峰電位相隔較遠(yuǎn)時(shí),定量很容易進(jìn)行。當(dāng)復(fù)合著色劑兩個(gè)峰電位相隔較近時(shí),將會(huì)對(duì)定量產(chǎn)生影響,減少取樣量或較稀的溶液可使影響降低。
(5)極譜法測(cè)定食品中合成著色劑的選擇性? 極譜法測(cè)定食品中合成著色劑,方法簡(jiǎn)單,操作容易,結(jié)果出示快,尤其適合于樣品中為單一色素及峰電位相隔較遠(yuǎn)的混合色素的測(cè)定。當(dāng)測(cè)定峰電位相隔較近的混合色素時(shí),需要摸索二者的影響程度,選擇恰當(dāng)?shù)娜恿炕驑悠废♂尦潭取?/p>
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焦點(diǎn)事件
