丙酮不能使蛋白質變性,不可以溶解蛋白質,但能讓蛋白質沉淀。
極性有機溶劑因引起蛋白質脫去水化層和降低介電常數(shù)而增加電荷間的相互作用而引起蛋白質沉淀。而如果控制在低溫下操作并盡量縮短處理時間則可使變性速度減慢。
使用丙酮沉淀時,必須在0~4℃低溫下進行,丙酮用量一般10倍于蛋白質溶液體積,蛋白質被丙酮沉淀時,應立即分離,否則蛋白質會變性,除了丙酮以外,也可用乙醇沉淀。
蛋白質變性因素
引起蛋白質變性的原因可分為物理和化學因素兩類。物理因素可以是加熱、加壓、脫水、攪拌、振蕩、紫外線照射、超聲波的作用等;化學因素有強酸、強堿、尿素、重金屬鹽、十二烷基硫酸鈉(SDS)等。