農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)
首先，無公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)過程中控制的重點是農(nóng)藥使用。一是品種控制，二是安全間隔期的控制。其次，無公害農(nóng)產(chǎn)品標準中檢測的重點是農(nóng)藥殘留（種植業(yè)產(chǎn)品）。
一、農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)類別
1.? 農(nóng)藥殘留的生物測定技術(shù)
利用指示生物的生理生化反應(yīng)來判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況。例如，可以用實驗室養(yǎng)的敏感性家蠅為測定材料，以其接觸待測樣品后的中毒程度來表示該樣品中的殺蟲劑殘留；以病菌生長受抑制的程度來檢測殺菌劑的殘留，以玉米或其它指示植物根長受抑制的程度來檢測土壤中磺酰脲類除草劑殘留等。該方法無需對樣品前處理比較簡單快速或無需進行前處理，但對指示生物要求較高，測定結(jié)果不能確定農(nóng)藥品種，并且可能出現(xiàn)假陽性或假陰性的情況，該方法可作為快速檢驗方法用于農(nóng)產(chǎn)品引起中毒或在現(xiàn)場使用。
2.? 農(nóng)藥殘留的理化檢測
用于農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測方法有分光光度法、極譜法、原子吸 收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標記法、核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等。自二十世紀九十年代以來，現(xiàn)代 化學(xué)分析技術(shù)日新月異，許多新技術(shù)已進入實用階段，如毛細管電脈儀技術(shù)（CZE），色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（GC-MS、HPLC-MS）超臨界流體色譜技術(shù)（SFC），直接光譜分析技術(shù)等。這些新技術(shù)的應(yīng)用，大大提高農(nóng)藥殘留分析的靈敏度，簡化分析步驟，提高了分析效率。 但是，這些分析方法有的靈敏度不高，如分光光度法、薄層層析法 等。有的需要昂貴的儀器，如色質(zhì)聯(lián)用法、核磁共振波譜法等。還
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有的需要特殊的設(shè)備，如同位素標記法等。因此，目前，普遍采用的還是氣相色譜法和液相色譜法，它們具有簡便、快速、靈敏以及穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好，線性范圍寬、耗資低等優(yōu)點。
（1）??????? 氣相色譜法（GC）
采用氣體作流動相的色譜法，用于揮發(fā)性農(nóng)藥的檢測，具有高選擇性、高分離效能、高靈敏度、快速和特點，是農(nóng)藥殘留量檢測最常用的方法之一，目前用于農(nóng)藥殘留檢測的檢測器主要有電子捕獲檢測器（ECD）、微池電子捕獲檢測器（u-ECD）、火焰光度檢測器（FPD）、脈沖火焰光度檢測器（P-FPD）、氮磷檢測器（NPD）等。
（2）??????? 液相色譜法（HPLC）
采用液體作流動相的一種色譜法，它可以分離檢測極性強、分子量大及離子型農(nóng)藥，可用于不易氣化或受熱易分解的農(nóng)藥的檢測。近年來，采用新型高效固定相、高壓泵和高靈敏度的檢測器，柱前和柱后衍生技術(shù)、以及計算機聯(lián)用等，大大提高了檢測效率、靈敏度、速度和操作自動化程度。目前用于農(nóng)藥殘留檢測最多是紫外吸收檢測器（UV）、兩極管陣列檢測器（DAD）和熒光檢測器（FLD）
（3）??????? 色質(zhì)聯(lián)用法（GC-MS,HPLC-MS）
氣相或液相與質(zhì)譜聯(lián)用，它既具備了色譜的高分離效能優(yōu)點， 而且具備了質(zhì)譜準確鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點，可同時達到定性、定量的檢測目的，特別適合于農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測和多殘留檢測等，不過此法需要貴重儀器且操作繁雜困難，不適合于經(jīng)常性的檢測。一般可用來做最后的確認工作。
（4）??????? 超臨界流體色譜（SFC）
是以超臨界流體作為流動相的色譜體系，超臨界流體是指物質(zhì)
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處于臨界溫度和臨界壓力時的狀態(tài)，介于氣、液態(tài)之間，兼有氣體和液體的某些物理特性，因此，超臨界流體色譜既有氣譜的快速、高效、靈敏的特點，又有能檢測對熱不穩(wěn)定和大分子化合物的液譜的特點。
（5）??????? 毛細管電泳法（CE）
該方法是利用毛細管及高電壓 (15-30KW)分離各種農(nóng)藥殘留物，非常適合于一些難于用傳統(tǒng)色譜法分離的離子化樣品的分離和分析，比HPLC 有高 10-1000 倍的分析能力，而且所需之緩沖液具有不危害環(huán)境之特點，在短時間(30 分鐘)內(nèi)就可以完成定性及定量分析。
3.? 常用農(nóng)藥殘留的快速檢測方法
（1）?? 酶抑制法：有機磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽堿脂酶抑制物，因此可以利用農(nóng)藥靶標酶-乙酰膽用堿酯酶（AChE） 受抑制的程度來檢測有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。該方法目前已開發(fā)出了相應(yīng)的各種速測卡和速測儀。該方法檢測時，蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂等物質(zhì)不會對農(nóng)藥殘留物的檢測造成干擾， 不必進行分離去雜，節(jié)省了大量預(yù)處理時間，從而能達到快速檢測的目的，因此該方法具有快速方便、前處理簡單、無需儀器或儀器相對簡單，適用于現(xiàn)場的定性和半定量測定，目前的農(nóng)藥殘留快速檢測就是用了該方法，已上升為農(nóng)業(yè)部行業(yè)標準。但該方法只能用于測定有機磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑，其靈敏度和所使用的酶、顯色反應(yīng)時間和溫度密切相關(guān)，經(jīng)酶法檢測出陽性后，需用標準儀器檢驗方法進一步檢測，以鑒定殘留農(nóng)藥品種及準確殘留量。
（2）?? 免疫分析法：有放射性免疫分析、酶免疫分析、多組份分析物免疫分析、免疫傳感器分析等。最為常用的是酶聯(lián)免疫法（ELISA 法），它主要是以抗原與抗體的特異性、可逆性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的農(nóng)藥殘留檢測方法。該法利用化學(xué)物質(zhì)在動物體內(nèi)能產(chǎn)生免疫抗體的原理，先將小分子農(nóng)藥化合物與大分子生物物質(zhì)結(jié)合成大分子，做成抗原，并使之在動物體內(nèi)產(chǎn)生抗體，對抗體篩選制成試劑盒，通過抗原與抗體之間發(fā)生的酶聯(lián)免疫反應(yīng)，依靠比色來確定農(nóng)藥殘留，它具有專一性強、靈敏度高、快速、操作簡單等優(yōu)點， 試劑盒可廣泛用于現(xiàn)場樣品和大量樣品的快速檢測，可準確定性、定量。但由于受到農(nóng)藥種類多，抗體制備難度大、在不能肯定樣本中的農(nóng)藥殘留種類時檢測有一定的盲目性以及抗體依賴國外進口等影響，酶聯(lián)免疫法的應(yīng)用范圍受到較大的限制，目前，我國市場上酶聯(lián)免疫法成品試劑盒依賴從國外進口。
（3）?? 化學(xué)法—速測靈法???????“速測靈”法應(yīng)用的原理是具有強催化作用的金屬離子催化劑，使各類有機磷農(nóng)藥（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下水解為磷酸與醇，水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，使顯色劑的紫紅色退去變成無色。主要針對的是有機磷農(nóng)藥的殘留檢測，特別是甲胺磷、對硫磷農(nóng)藥。這種方法采用化學(xué)反應(yīng)原理，避免了通常所使用生化方法（酶法）的缺點（酶的制備、保存以及反應(yīng)需比較嚴格的條件），靈敏度也達到一定的要求。但是此方法主要針對的是甲胺磷、對硫磷等較高毒性的有機磷農(nóng)藥殘留的定性檢測。
該方法的特點是操作簡便、價格便宜、檢測速度快，通過進一步改善試劑性能，規(guī)范測定技術(shù)，可提高檢測的靈敏度和準確性， 從而為當前廣大城鄉(xiāng)農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和銷售者所青睞。
二、幾種檢測農(nóng)藥殘留方法的比較
氣相色譜儀???? 是目前比較權(quán)威的方法，可以精確定量，可測出多種不同種類農(nóng)藥。但檢測成本高，儀器操作須專業(yè)人員，前處理要求較高，時間長。
活體生物檢測 不需要儀器，無須前處理，對各種毒物都可以測定。但難以找到與該產(chǎn)品同時種植的未施農(nóng)藥產(chǎn)品做對照，只能估算，不能精確定量分析，受很多因素影響。
免疫法檢測 特異性強，靈敏度高，快速簡便，可準確定性， 定量，適用于現(xiàn)場檢測。但抗體制備比較困難，不能肯定試樣中的農(nóng)藥品種時，有一定的盲目性，易出現(xiàn)假陰，假陽性現(xiàn)象。
酶抑制法檢測 使用殘毒速測箱，無須大型設(shè)備和專業(yè)人員， 成本較低，酶片保存時間長，靈敏度低，不能定量。
比色法?? 靈敏度高，操作簡便，檢測快，可檢測多種殘毒綜合量,酶易失活，不易保存，檢測時受溫度影響，需要控制的條件較多。
傳感器 靈敏度高，儀器自動化程度高，響應(yīng)時間短，適合現(xiàn)場檢測。但方法選擇性有限，原理單一（僅限于膽堿酯酶的功能被抑制）生物材料固定化易失活。
化學(xué)法 速度快、成本低、操作簡便、針對性強，尤其適合于現(xiàn)場檢測。但適用范圍小，僅限于果蔬的有機磷農(nóng)藥殘留檢測。
三、農(nóng)藥殘留檢測發(fā)展趨勢
農(nóng)藥殘留分析是分析化學(xué)中最復(fù)雜的領(lǐng)域，其原因主要是：
1.? 需分離和測定的殘留農(nóng)藥量往往是在 ng(10-9g)、pg（10-12g） 甚至在 fg(10-15g)級，一次成功的分析需要有許多操作條件的正確結(jié)合和選擇，尤其是萃取和凈化方法的成功應(yīng)用；
2.? 分析樣品用藥歷史的未知性即污染源的未知性和樣品種類的多樣性；
3.? 一次樣品測定能分析多種農(nóng)藥殘留，即多殘留分析的要求。
????????農(nóng)藥殘留的萃取、凈化技術(shù)是農(nóng)藥殘留分析的關(guān)鍵。包括：
固相萃?。⊿PE）技術(shù)；
超臨界流體萃取技術(shù)(SFE)；
固相微萃取技術(shù)（SPME）；
凝膠萃取技術(shù)（GPC：凝膠滲透色譜）；
快速溶劑萃?。≒SE）。
隨著高新分析技術(shù)引入農(nóng)藥殘留檢測之中，發(fā)達國家目前經(jīng)常采用如氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、毛細管電泳與質(zhì)譜聯(lián)用、以及氣相、液相色譜與多級質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等。這些技術(shù)的應(yīng)用大大提高了農(nóng)藥殘留檢測的定性能力和檢測的靈敏度、檢測限和檢測覆蓋范圍。
采用氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)或液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，首先對樣品中的農(nóng)藥種類進行定性分析，對確定的農(nóng)藥殘留量再利用氣相色譜進行定量分析。此種方法可以一次排除樣品中許多農(nóng)藥， 節(jié)省了大量的時間和操作。而我國目前的檢測方法正好與之相反。
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