硫酸鏈霉素的鑒別檢查方法
鑒別
(1)取本品約0.5mg,加水4ml溶解后,加氫氧化鈉試液2.5ml與0.1%8-羥基喹啉的乙醇溶液1ml,放冷至約15℃,加次溴酸鈉試液3滴,即顯橙紅色。(2)取本品約20mg,加水5ml溶解后,加氫氧化鈉試液0.3ml,置水浴上加熱5分鐘,加硫酸鐵銨溶液(取硫酸鐵銨0.1g,加0.5mol/IL硫酸溶液5ml使溶解)0.5m,即顯紫紅色(3)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜(光譜集491圖)一致。(4)本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)(通則0301)
檢查
酸度取本品,加水制成每1m1中含20萬單位的溶液,依法測定(通則0631),pH值應(yīng)為4.5~7.0。溶液的澄清度與顏色取本品5份,各1.5g,分別加水5ml,溶解后,溶液應(yīng)澄清無色;如顯渾濁,與2號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃;如顯色,與各色5號標準比色液(通則0901第一法)比較,均不得更深硫酸鹽取本品0.25g,精密稱定,置碘量瓶中,加水100ml使溶解,用氨試液調(diào)節(jié)pH值至11,精密加入氯化鋇滴定液(0.1mol/L)loml與酞紫指示液5滴,用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.1mol/IL)滴定,注意保持滴定過程中的pH值為11,滴定至紫色開始消褪,加乙醇50ml,繼續(xù)滴定至紫藍色消失,并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml氯化鋇滴定液(0.1mol/L)相當于9.606mg的硫酸鹽(SO4)。按干燥品計算,含硫酸鹽應(yīng)為18.0%~21.5%。有關(guān)物質(zhì)照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品適量,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含鏈霉素3.5mg的溶液對照溶液(1)精密量取供試品溶液適量,用水定量稀釋制成每1ml中約含鏈霉素354g的溶液對照溶液(2)精密量取供試品溶液適量,用水定量稀釋制成每1ml中約含鏈霉素70gg的溶液。對照溶液(3)精密量取供試品溶液適量,用水定量稀釋制成每1m中約含鏈霉素0.14mg的溶液。系統(tǒng)適用性溶液取鏈霉素標準品適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含鏈霉素3.5mg的溶液,置日光燈(30001x)下照射24小時;另取妥布霉素標準品適量,用此溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含妥布霉素0.06mg的混合溶液色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.15mol/L的三氟醋酸溶液為流動相;流速為每分鐘0.5ml;用蒸發(fā)光散射檢測器檢測(參考條件:漂移管溫度為110℃,載氣流速為每分鐘2.8L);進樣體積10l系統(tǒng)適用性要求系統(tǒng)適用性溶液色譜圖中,鏈霉素峰保留時間約為10~12分鐘,鏈霉素峰與相對保留時間約為處的雜質(zhì)峰的分離度和鏈霉素峰與妥布霉素峰之間的分離度應(yīng)分別大于1.2和1.5。對照溶液(1)~(3)色譜圖中,以對照溶液濃度的對數(shù)值與相應(yīng)峰面積的對數(shù)值計算線性回歸方程,相關(guān)系數(shù)(r)應(yīng)不小于0.99測定法精密量取供試品溶液與對照溶液(1)、(2)、(3),分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰(除硫酸峰外),用線性回歸方程計算,單個雜質(zhì)不得過2.0%,雜質(zhì)總量不得過5.0%。干燥失重取本品,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥4小時,減失重量不得過6.0%(通則0831)?？梢姰愇锶”酒?份,每份為制劑最大規(guī)格量,加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0904),應(yīng)符合規(guī)定。(供無菌分裝用)不溶性微粒取本品,加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0903),每1g樣品中,含10gm及10m以上的微粒不得過600粒,含25m及25m以上的微粒不得過600粒供無菌分裝用)異常毒性取本品,加氯化鈉注射液制成每1ml中約含2600單位的溶液,依法檢查(通則1141),按靜脈注射法給藥,觀察24小時,應(yīng)符合規(guī)定。(供注射用)細菌內(nèi)毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1mg鏈霉素中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于0.25EU。(供注射用)無菌取本品,用適宜溶劑溶解并稀釋后,經(jīng)薄膜過濾法處理,依法檢查(通則1101),應(yīng)符合規(guī)定。另取裝量10ml的0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基6管,分別加人每1ml中含2萬單位的溶液0.25~0.5ml,3管置30~35℃培養(yǎng),另3管置20~25℃培養(yǎng),應(yīng)符合規(guī)定。(供無菌分裝用)
