血片及骨髓片的觀察(一)
實驗原理
血涂片及骨髓片的顯微檢查是血液細胞學檢查的基本方法,臨床上應(yīng)用極為廣泛。觀察血片或骨髓片是血液性疾病的重要的輔助手段之一。
實驗方法
材料:
血片、骨髓片、顯微鏡。
方法:
1.觀察外周血涂片時,選擇細胞分布均勻的區(qū)域(細胞不擁擠,體尾交界處)低倍鏡下估計細胞分布和染色情況,瀏覽全片,特別是血膜的兩側(cè)和尾部,以防異常成分漏檢。再用油鏡觀察體尾交界處細胞形態(tài)油鏡下觀察細胞數(shù)量及分類。
2.骨髓片檢查時,選擇一張染色好、骨髓小粒多、頭體尾鮮明的骨髓涂片。在普通光鏡下運用低、中、高三種鏡頭,仔細觀查,對涂片中的細胞作數(shù)量
和質(zhì)量方面的檢查與評價。用低倍鏡判斷骨髓涂片的質(zhì)量包括厚薄、染色、骨髓小粒等情況;觀察巨核系統(tǒng)增生情況并計數(shù);全片觀察有無體積較大或成堆分布的異
常細胞,尤其注意觀察涂片邊緣和尾部。用高倍鏡觀察有核細胞增生程度。用油鏡觀察細胞形態(tài),計數(shù)分類。
實驗結(jié)果計算
正常外周血成熟細胞形態(tài)觀察
1.成熟紅細胞:淡紅色,無核的圓形細胞,因紅細胞為雙凹形,故邊緣部分染色較深,中心較淺,直徑7-8微米。
2.嗜中性粒細胞:中性分葉核粒細胞:細胞呈圓形,直徑10~15微米。胞核分葉狀,常分為2~5葉,以分3葉者多見,葉與葉之間有細絲相連或
完全斷開,核染色質(zhì)濃集或呈小塊狀,染深紫紅色。胞質(zhì)豐富,呈淡紅色,布滿細小紫紅色的中性顆粒。桿狀核粒細胞:細胞呈圓形,直徑10~15微米。胞核狹
長,彎曲呈帶狀,兩端鈍圓。核染色質(zhì)粗糙呈塊狀,染深紫紅色,胞質(zhì)中含特異中性顆粒。
3.嗜酸性粒細胞:略大于嗜中性粒細胞,細胞核染成紫色,通常為2葉,胞質(zhì)充滿嗜酸性大圓顆粒,被染成橘紅色。直徑10-15微米。
4.嗜堿性粒細胞:體積略小于嗜酸性粒細胞,細胞質(zhì)中有大小不等被染成紫色的顆粒,顆粒數(shù)目較嗜酸性粒細胞的顆粒少,核1-2葉,染成淡藍色。直徑10-11微米。
5.淋巴細胞:可觀察到大、小型兩種。小淋巴細胞與紅細胞大小相似,圓形,核致密,染成深紫色。周圍僅一薄層嗜堿性染成淡藍的細胞質(zhì)。大淋巴細胞較大,核圓形。直徑6-8微米。
6.單核細胞:體積最大,細胞圓形。胞質(zhì)染成灰藍色。核呈腎形或馬蹄形,染色略淺于淋巴細胞的核。直徑14-20微米。
7.血小板:為不規(guī)則小體,直徑2-3微米。其周圍部分淺藍色,中央有細小的紫紅色顆粒,聚集成群。
骨髓紅細胞系各期細胞形態(tài)觀察
1.原紅細胞:細胞圓形或橢圓形,直徑15~22微米,細胞邊緣有時可見基底寬的半球狀或瘤狀突起。胞核圓形,居中或稍偏位,約占細胞直徑的
4/5。核染色質(zhì)呈細砂狀或細粒狀,較原粒細胞著色深而粗密。核仁1~5個,呈暗藍色,界限不甚清晰,常很快消失。胞質(zhì)量少,不透明,深藍色,有時核周形
成淡染區(qū),胞質(zhì)內(nèi)不含顆粒。
2.早幼紅細胞:圓形或橢圓形,直徑11~20微米。胞核圓形,居中或稍偏位,約占細胞直徑的2/3。核染色質(zhì)開始凝集成小塊狀,核仁消失。胞質(zhì)量稍多,不透明深藍色,有時胞質(zhì)著色較原紅更深,仍可見瘤狀突起及核周淡染區(qū),不含顆粒。
3.中幼紅細胞:細胞呈圓形,直徑8~18微米。胞核圓形,約占細胞的1/2。染色質(zhì)凝集成團塊狀或粗索狀,似車輪狀排列,其間有明顯的淡染區(qū)域。胞質(zhì)量較多,因內(nèi)含血紅蛋白逐漸增多,可呈著色不均勻的不同程度的嗜多色性。
4.晚幼紅細胞:圓形,直徑7~12微米。胞核圓形,居中,占細胞的1/2以下。核染色質(zhì)凝聚成大塊狀或固縮成團,呈紫褐色或紫黑色。胞質(zhì)量多,呈均勻的淡紅色或極淡的灰紫色。