瓊脂糖凝膠電泳的原理是什么
瓊脂糖凝膠電泳是以瓊脂糖為介質(zhì)，對不同大小的DNA?或?RNA?實(shí)現(xiàn)分離的一種電泳方法。瓊脂糖是一種多糖，具有親水性，但是不帶電荷。
使得?DNA?在堿性條件下使其帶負(fù)電荷（pH8.0?的緩沖液），在電流作用下，以瓊脂糖凝膠為介質(zhì)，由負(fù)極向正極移動，根據(jù)不同的?DNA?分子片段的大小和形狀不同，在電場中泳動的速率也不相同，同時在樣品中加入染料能夠和DNA?分子間形成絡(luò)合物，經(jīng)過紫外照射，可以看到?DNA?的位置，從而達(dá)到分離、鑒定的目的。
瓊脂糖凝膠電泳注意事項(xiàng)
底板一定要用膠帶封緊，否則灌膠時凝膠會漏出?？梢栽诠嗄z時先倒少量凝膠在交界處，利用凝固的凝膠將其封緊。
梳子一定不能插到底部，應(yīng)距離底部1-2mm，否則拔梳子時容易弄破凝膠，導(dǎo)致漏膠，加熱時應(yīng)注意不要讓瓊脂糖沸騰得太厲害，稍稍沸騰至溶液清涼，即其全部溶解即可，過度沸騰會導(dǎo)致凝膠實(shí)際濃度的提高。
將凝膠放入電泳槽時要注意極性，不要正負(fù)極顛倒。要注意撕去兩端的封帶，凝膠的濃度與待分離的DNA的大小有關(guān)。一般濃度為1%，低濃度的膠特別易碎，要注意。
推薦
熱點(diǎn)排行
一周推薦
