SMRT測序和Nanopore測序有哪些相同點(diǎn)和差異
第一代DNA測序技術(shù)(又稱Sanger測序)在1975年,由Sanger等人開創(chuàng),并在1977年完成第一個基因組序列(噬菌體X174),全長5375個堿基。研究人員經(jīng)過30年的實(shí)踐并對技術(shù)及測序策略的不斷改進(jìn)(如使用了不同策略的作圖法、鳥槍法),2001年完成的首個人類基因組圖譜就是以改進(jìn)了的Sanger法為其測序基礎(chǔ)。
原理:在4個DNA合成反應(yīng)體系(含dNTP)中分別加入一定比例帶有標(biāo)記的ddNTP(分為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),通過凝膠電泳和放射自顯影后可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列。由于ddNTP的2’和3’都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以用來中斷DNA合成反應(yīng)。
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