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熒光光譜怎么確定激發(fā)波長

2021.5.18

(1) 如果你的儀器有三維掃描功能,那就非常簡單了,按照說明書要求去做就可以了。


(2) 如果儀器沒有上述功能,一般可將儀器的激發(fā)波長(EX)先設(shè)定為200nm,然后進(jìn)行發(fā)射波長(EM)模式掃描,(EM)波長范圍暫設(shè)定為 210-800nm,然后記錄所有出現(xiàn)的峰值波長;改變激發(fā)波長(EX)后再掃描,如第二次發(fā)射圖譜中的某個(gè)(或某些)峰的位置沒有位移(或位移很少),一般來說這個(gè)(或這些)峰就是熒光峰;因?yàn)闊晒夥宓奈恢檬遣浑S激發(fā)波長的改變而改變的,僅是峰高(或峰面積)發(fā)生改變。


(3) 將確定的熒光峰的波長作為發(fā)射波長(EM)固定下來,再做激發(fā)波長(EX)的掃描,激發(fā)波長的范圍要小于發(fā)射波長(根據(jù)斯拖克斯定律);如果僅出一個(gè)峰則很簡單確立下來,再將這個(gè)波長固定下來重新做真正的發(fā)射波長(EM)掃描,可以得到良好的信噪比的結(jié)果值;如果做激發(fā)波長(EX)掃描后出現(xiàn)幾個(gè)峰,則需要有經(jīng)驗(yàn)的選擇了,一般選擇峰形高度適合并又有一定帶寬的峰為激發(fā)波長。


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