血清加甲醇和乙腈沉淀蛋白區(qū)別
甲醇高氯酸沉淀蛋白區(qū)別
鹽析 ——用于各種蛋白質(zhì)酶離純化；
蛋白質(zhì)溶液加入量性鹽破壞蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定性使其析種稱鹽析用性鹽硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等各種蛋白質(zhì)鹽析所需鹽濃度及pH同故用于混蛋白質(zhì)組離例用半飽硫酸銨沉淀血清球蛋白飽硫酸銨使血清白蛋白、球蛋白都沉淀鹽析沉淀蛋白質(zhì)經(jīng)透析除鹽仍保證蛋白質(zhì)性調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液pH至等電點(diǎn)再用鹽析則蛋白質(zhì)沉淀效更鹽析兩類第類叫Ks段鹽析定PH溫度通改變離強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)用于早期粗提液；第二種叫b段鹽析定離強(qiáng)度通改變PH溫度實(shí)現(xiàn)用于期進(jìn)步離純化結(jié)晶影響鹽析素包括：蛋白質(zhì)濃度、離強(qiáng)度類型、PH值、溫度等針溫度條需要強(qiáng)調(diào)：低離強(qiáng)度或純水蛋白質(zhì)溶解度定范圍內(nèi)隨溫度增加增加高濃度蛋白質(zhì)、酶肽類物質(zhì)溶解度隨溫度升降般情況蛋白質(zhì)鹽析溫度特殊要求室溫進(jìn)行某些溫度比較敏酶要求0-4℃進(jìn)行
使用硫酸銨沉淀蛋白需要注意：硫酸銨含少量重金屬離蛋白質(zhì)巰基敏作用使用前必須用H2S處理：硫酸銨配濃溶液通入H2S飽放置夜用濾紙除重金屬離濃縮結(jié)晶100℃烘干使用另外高濃度硫酸銨溶液般呈酸性（PH=5.0左右）使用前需要用氨水或硫酸調(diào)節(jié)至所需PH
機(jī)溶劑沉淀 ——用于物、糖及核酸產(chǎn)品離純化；
機(jī)溶劑沉淀機(jī)理降低水介電數(shù)導(dǎo)致具表面水層物脫水相互聚集析該優(yōu)點(diǎn)于：1）辨能力比鹽析高即蛋白質(zhì)或其溶劑比較窄機(jī)溶劑濃度沉淀；2）沉淀用脫鹽濾較容易；3）化制備應(yīng)用比鹽析廣泛溫機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性例酒精消毒滅菌操作要求低溫進(jìn)行機(jī)溶劑選擇首先能水混溶使用較機(jī)溶劑乙醇、甲醇、丙酮二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈2-甲基-2,4戊二醇等
等電點(diǎn)沉淀 ——單獨(dú)應(yīng)用較少與其結(jié)合使用；
兩性電解質(zhì)凈電荷零溶解度低同兩性電解質(zhì)具同等電點(diǎn)基礎(chǔ)進(jìn)行離工業(yè)產(chǎn)胰島素粗提液先調(diào)PH8.0除堿性蛋白質(zhì)再調(diào)PH3.0除酸性蛋白質(zhì)利用等電點(diǎn)除雜蛋白必須解制備物酸堿穩(wěn)定性盲目使用十危險(xiǎn)少蛋白質(zhì)與金屬離結(jié)合等電點(diǎn)發(fā)偏移故溶液含金屬離必須注意調(diào)整PH值等電點(diǎn)與鹽析、機(jī)溶劑沉淀或其沉淀聯(lián)合使用提高其沉淀能力
重金屬鹽沉淀 ——用于搶救誤服重金屬鹽毒??；
許機(jī)物質(zhì)包括蛋白內(nèi)堿性溶液帶負(fù)電荷能與金屬離形沉淀根據(jù)機(jī)物與間作用機(jī)制羧酸、胺及雜環(huán)等含氮化合物類銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類鈣鎂鉛；親硫氫基化合物類汞銀鉛蛋白質(zhì)-金屬離復(fù)合物重要性質(zhì)溶解度溶液介電數(shù)非敏調(diào)整水溶液介電數(shù)（加入機(jī)溶劑）即沉淀種蛋白沉淀?xiàng)l件pH稍于等電點(diǎn)宜重金屬沉淀蛋白質(zhì)變性若低溫條件并控制重金屬離濃度用于離制備變性蛋白質(zhì)臨床利用蛋白質(zhì)能與重金屬鹽結(jié)合種性質(zhì)搶救誤服重金屬鹽毒病給病口服量蛋白質(zhì)用催吐劑結(jié)合重金屬鹽嘔吐解毒
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焦點(diǎn)事件
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焦點(diǎn)事件
