1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

邁維代謝13種糖類數(shù)據(jù)庫(kù)(MWDB)

　　糖類是多羥基醛或酮類及水解后能生成多羥基醛或酮的一類化合物，由碳?xì)溲跞N元素組成。地球上生物量干重的50%以上是由糖的聚合物構(gòu)成，糖類物質(zhì)按干重占植物的85%-90%。糖類物質(zhì)是生物體的結(jié)構(gòu)成分，同時(shí)也是生物體內(nèi)的主要能源物質(zhì)。邁維代謝應(yīng)用同位素內(nèi)標(biāo)，準(zhǔn)確定量檢測(cè)13種糖類物質(zhì)。

　　2. 應(yīng)用領(lǐng)域

　　◆ 果實(shí)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的研究

　　◆ 逆境脅迫(高溫、鹽堿等)的研究

　　◆ 糖代謝調(diào)控途徑的研究

　　◆ 糖生物活性(免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤等)研究

　　3. 技術(shù)特點(diǎn)

　　儀器平臺(tái)：Agilent7890B-7000D GC-MS/MS

　　項(xiàng)目周期：45個(gè)自然日

　　樣本要求：建議3g，最低1g

　　質(zhì)控：混標(biāo)、空白、混樣。

　　4. 技術(shù)路線

　　5. 樣品要求

　　植物激素檢測(cè)樣品要求

　　1.樣品類型

　　a.細(xì)胞，取樣后離心，去除培養(yǎng)基，立即放入液氮中，之后-80°保存;

　　b.葉片、莖、花等，取下后立即放入液氮中，之后-80°保存;

　　c.果實(shí)的果肉、果皮等，如果野外現(xiàn)場(chǎng)不具備分離條件，需盡快(30 min內(nèi))轉(zhuǎn)移至室內(nèi)，分離樣品放入液氮中，之后-80°保存。

　　2.混合取樣

　　每份樣品混合來自至少3株以上的組織。以水稻葉片為例：取同一時(shí)期，表型基本一致的同一個(gè)部位的1片葉片，同時(shí)取6株，放到鉆孔的10ml離心管中，并迅速放入液氮中。

　　3.樣品重量和重復(fù)

　　新鮮的、干凈的植物樣品(鮮樣)，樣本建議量>1g，最少量>0.6g。

　　準(zhǔn)備3份及以上生物學(xué)重復(fù)。

　　4.儲(chǔ)存和運(yùn)輸

　　干冰運(yùn)輸(以3-4公斤干冰揮發(fā)一天計(jì)算，請(qǐng)使用足量的干冰運(yùn)輸)。

　　6. 文章案例

　　標(biāo)題：阿拉伯糖的生物合成在擬南芥耐鹽中的重要作用

　　方案設(shè)計(jì)：

　　1.通過EMS誘變篩選對(duì)鹽敏感的突變體。

　　2.利用突變體和野生型雜交獲得分離群體，并在鹽敏感突體中鑒定到MUR4 基因的突變。

　　3.通過其它兩個(gè)該基因發(fā)生突變的材料以及MUR4 基因過表達(dá)材料進(jìn)行表型鑒定以及阿拉伯糖含量測(cè)定驗(yàn)證該基因?qū)е铝藢?duì)鹽敏感的表型。

　　結(jié)果分析：

　　1.作者利用EMS方法構(gòu)建了高鹽條件下根伸長(zhǎng)受到抑制的突變體，通過鹽脅迫發(fā)現(xiàn)，與野生型相比，兩個(gè)突變體在MS培養(yǎng)基上根都能正常生長(zhǎng)，但在MS培養(yǎng)基上添加NaCl，根伸長(zhǎng)都受到抑制。這說明在鹽脅迫下MUR4是根伸長(zhǎng)所必需的。

　　2. 突變體鹽脅迫處理后，Ara含量大幅度下降，將幼苗轉(zhuǎn)移到NaCl培養(yǎng)基上并補(bǔ)充外源Ara，結(jié)果發(fā)現(xiàn)突變體的根伸長(zhǎng)程度恢復(fù)到了野生型水平，而添加另外兩種單糖并不能恢復(fù)突變體的表型。

　　3.在顯微鏡下觀察mur4-1 突變體和野生型的根細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)在正常條件下兩種材料的根細(xì)胞形態(tài)并沒有差異。但是在鹽脅迫條件下，野生型能夠保持根系伸長(zhǎng)，而mur4-1 突變體的根細(xì)胞發(fā)生扭曲，它們的細(xì)胞與細(xì)胞間的粘附被嚴(yán)重破壞。

　　4.MUR4 的三個(gè)旁系基因MURL、DUR、MEE25 在鹽處理后同樣上調(diào)表達(dá)。分別得到三個(gè)基因的突變體進(jìn)行鹽脅迫處理，發(fā)現(xiàn)與野生型相比，它們的根伸長(zhǎng)均未受到抑制。說明在鹽脅迫下，MUR4/HSR8 在調(diào)控根伸長(zhǎng)上起主要作用。

　　7.參考文獻(xiàn)

　　Chunzhao Zhao, Omar Zayed, Fansuo Zeng. et al.Arabinose biosynthesis is critical for salt stress tolerance in Arabidopsis . Plant Physiology, 2019.

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